Confocal microscopie intravitala a corneei

Microscopia confocală a corneei este una dintre metodele moderne de investigare; permite efectuarea monitorizării intravitale a stării corneei cu vizualizarea țesuturilor la nivel celular și microstructural.

Această metodă, datorită designului original al microscopului și a rezoluției sale ridicate, permite vizualizarea țesuturilor corneene vii , măsurarea grosimii fiecăruia dintre straturile sale și evaluarea gradului de perturbări morfologice.

Scopul microscopiei confocale a corneei

Caracterizează modificările morfologice ale corneei, care rezultă din diferite boli inflamatorii și distrofice, precum și din intervențiile chirurgicale și efectele CR.

Datele morfologice sunt necesare pentru a evalua severitatea procesului patologic, eficacitatea tratamentului și a determina tactica managementului pacientului.

Indicații pentru procedură

• Bolile inflamatorii ale corneei ( keratita ).
• Bolile distrofice ale corneei ( keratoconus, distrofia lui Fuchs, etc.).
• Sindromul "ochiului uscat".
• Condiții după intervenții chirurgicale pe cornee (prin transplant de cornee, operații keratorefractive).
• Condiții asociate purtării lentilelor de contact.

[1], [2], [3], [4]

Preparare

Acest studiu este posibil fără utilizarea anestezicelor. O picătură de lichid de imersiune este plasată pe lentila lentilei microscopice confocale. Aceasta elimină contactul direct al lentilei cu corneea și minimizează riscul de leziuni epiteliale.

[5], [6], [7], [8], [9],

Tehnică microscopia confocală a corneei

Studiul este efectuat pe un microscop confocal ConfoScan 4 (Nider), cu o creștere de 500 de ori. Dispozitivul vă permite să examinați corneea pe întreaga grosime a acesteia.

Dimensiunea zonei investigate este de 440 × 330 μm, grosimea stratului de scanare este de 5 μm. O lentilă cu picătură de gel este adusă în cornee pentru a atinge și a se seta astfel încât grosimea stratului de lichid de imersie să fie de 2 mm. Proiectarea dispozitivului vă permite să examinați corneea din zona centrală și din zonele sale paracentrale.

Contraindicații la procedură

Contraindicația relativă marchează iritarea ochiului pe fundalul unui proces inflamator acut.

[10], [11]

Performanță normală

Imaginea morfologică normală a corneei

Epiteliul anterior constă din 5-6 straturi de celule. Grosimea medie a întregului epiteliu este de aproximativ 50 μm. În funcție de structura morfologică, se disting următoarele straturi (din interior spre exterior): bazale, subulate și superficiale.

• Stratul cel mai intim (bazal) este reprezentat de celule cilindrice dense mici, fără nucleu vizibil. Granițele celulei bazale sunt clare, strălucitoare.
• Stratul intermediar este alcătuit din 2-3 straturi de celule în formă de coloană (în aripioare) cu invaginații profunde, în care se construiesc creșteri ale celulelor vecine. Din punct de vedere microscopic, limitele celulare sunt destul de bine distincționabile, iar nucleele nu pot fi definite sau fuzzy.
• Stratul de suprafață al epiteliului este reprezentat de unul sau două straturi de celule poligonale cu limite clare și o densitate omogenă. Nucleele sunt, de obicei, mai luminoase decât citoplasma, în care se poate distinge și un nucleu închis la nucleu aproape.

Printre celulele stratului de suprafață se disting între întuneric și lumină. Reflexia crescută a celulelor epiteliale indică o scădere a nivelului de metabolism în ele și începutul descuamării lor.

Membrana Bowman este o structură transparentă care nu reflectă lumina, deci este imposibil să o vizualizăm atunci când se efectuează microscopie confocală.

Sub plexul nervos subbasic se află sub membrana Bowman. În mod normal, fibrele nervoase arată ca niște benzi strălucitoare care rulează în paralel pe un fundal închis, contactându-se unii pe alții. Reflectivitatea (reflexia) poate fi inegală în lungimea fibrelor.

Stromul corneei ocupă 80-90% din grosimea corneei și constă dintr-o componentă celulară și extracelulară. Elementele celulare de bază ale stromei sunt keratocitele; constituie aproximativ 5% din volum.

Un tipar tipic microscopic al stratului include câteva corpuri neregulate, neregulate, în formă de oval (nuclei de keratocite), care se află în grosimea unei matrice transparente gri închis sau negru. În mod normal, vizualizarea structurilor extracelulare este imposibilă din cauza transparenței. Stromul poate fi împărțit condiționat în substraturi: anterior (situat direct sub membrana Bowman și constituie 10% din grosimea stratului), anterioară, mijlocie și posterioară.

Densitatea medie a keratocitelor este mai mare în stria anterioară, treptat, numărul lor scade spre straturile posterioare. Anterioare densitate de celule stromale de aproape doua ori mai mare decât celulele stromale din spate (în cazul în care densitatea celulelor stromei anterioare luate ca 100%, atunci densitatea spate în jur de 53,7% din celule). În structura anterioară, nucleele de keratocite au o formă rotundă în formă de fasole și în ovalul posterior și mai alungit.

Nucleul keratocitelor poate diferi în luminozitate. Capacitatea diferită de a reflecta lumina depinde de starea lor metabolică. Celulele mai luminoase sunt considerate ca fiind keratocite activate ("celule de stres"), ale căror activități vizează menținerea homeostazei corneene interne. În normă și în câmp vizual, există celule singulare activate.

Fibrele nervoase din stria anterioară a corneei sunt vizualizate ca benzi omogene, formând adesea bifurcații.

Membrana descemată este în mod normal transparentă și nu este vizualizată prin microscopie confocală.

Epiteliul posterior este un monostrat de celule plate hexagonale sau poligonale, cu o suprafață uniformă, ușor, pe fundalul unor limite intercelulare întunecate.

Dispozitivul oferă posibilitatea de a calcula manual sau automat densitatea celulelor, aria lor și coeficientul de variabilitate.

Modificări patologice în structura corneei

Keratoconus se caracterizează prin schimbări semnificative în epiteliul anterior și în stroma corneei.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20]