Proteina Bence-Jones

Urina unei persoane sănătoase nu conține proteina Bence-Jones, care este reprezentată de lanțuri ușoare de imunoglobuline detectate ca urmare a formării proceselor tumorale maligne.

Testele de laborator pentru prezența proteinelor specifice cu greutate moleculară mică sunt necesare pentru diagnosticarea unui număr de afecțiuni patologice (cel mai adesea probleme cu sistemul β-imunitar), precum și pentru determinarea eficacității terapiei utilizate.

În exces, proteina Bence-Jones este produsă de plasmocite, se deplasează odată cu fluxul sanguin și este excretată prin urinare. Această ultimă proprietate a corpurilor proteice permite suspectarea următoarelor boli la examinarea urinei:

• mielom;
• osteosarcom;
• plasmocitom;
• leucemie limfocitară cronică;
• limfogranulomatoză;
• amiloidoză primară;
• macroglobulinemie;
• gammapatie monoclonală idiapatică.

Legătura dintre eliberarea unei proteine specifice și disfuncția renală ulterioară cauzată de efectul toxic al corpilor proteici asupra structurilor epiteliale ale tubulilor renali, care la rândul său provoacă fenomenul de distrofie, sindrom Fanconi și amiloidoză renală, a fost confirmată clinic.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Proteina Bence Jones în urină

Prezența proteinelor în urină se numește proteinurie. Proteinuria prerenală este înțeleasă ca prezența unei cantități uriașe de proteine cu greutate moleculară mică în urină. În acest caz, nu există leziuni ale filtrului renal și tubulilor, iar funcția renală normală nu este capabilă să asigure reabsorbția corpurilor proteice. Proteinuria extrarenală (falsă), adică care apare fără afectarea funcției renale, indică prezența unui proces infecțios sau malign în organism. Proteinuria este observată în 60-90% din cazurile de pacienți cu mielom. Aproximativ 20% din afecțiunile patologice sunt mielom Bence-Jones.

Proteina Bence-Jones în urină este diferențiată datorită modificărilor umorale ale sistemului imunitar β. Apariția corpilor proteici este asociată cu patologia mielomului, hemoblastozele paraproteinemice, endotelioza, macroglobulinemia Waldenstrom, leucemia limfatică, osteosarcoamele. Depistarea proteinei Bence-Jones în urină este o etapă importantă de diagnostic și prognostic. Datorită greutății sale moleculare mici, proteina Bence-Jones este excretată în urină, lezând epiteliul tubulilor renali, ceea ce este plin de dezvoltarea insuficienței renale, care poate duce la deces. Clasificarea la timp a proteinei în funcție de tip este, de asemenea, importantă: proteina λ are un efect nefrotoxic mai mare decât proteina κ.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Testul Bence Jones pentru proteine

Prezența altor corpuri proteice decât serul în urină indică leucemie limfatică, osteosarcom sau mielom (procese tumorale ale măduvei osoase). Proteina Bence-Jones, atunci când filtratul de urină este încălzit la 45-60º C, precipită sub formă de sediment tulbure care se depune pe pereții eprubetei. O creștere suplimentară a temperaturii până la valori de fierbere dizolvă turbiditatea separată.

Testul cantitativ pentru proteina Bence Jones se efectuează după cum urmează:

• folosind ca reactiv parțial apă și parțial acid azotic;
• plasarea acidului azotic (0,5-1 ml) într-o eprubetă, stratificând același nivel de urină testată;
• evaluarea rezultatului după 2 minute (apariția unui inel subțire la limita mediului lichid indică prezența a 0,033% corpuri proteice).

Observarea unui inel filiform necesită diluarea urinei cu apă într-un raport de 1:1, apariția unui inel gros indică necesitatea amestecării unei părți din urină cu trei părți de apă, iar în cazul unui inel compact, o porțiune de urină este diluată cu șapte porții de apă. Mai mult, diluarea continuă până când sedimentul caracteristic apare în minutul 2-3 de la testare.

Cantitatea de proteine conținute se calculează prin înmulțirea a 0,033% cu valoarea diluției. De exemplu, urina a fost diluată de 10 ori, inelul de corpuri proteice a apărut la sfârșitul celui de-al 3-lea minut de studiu, apoi procentul de includere a proteinelor se calculează după cum urmează: 0,033x10=0,33.

Dacă nu există sediment, se evaluează gradul de turbiditate - urme pronunțate, slabe sau abia distincte de turbiditate.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Secreția de proteine Bence Jones

În funcție de tipul de imunoglobulină secretată, se face distincția între:

• patologii ale lanțurilor ușoare (secreția de proteine Bence Jones);
• glomerulopatie (secreția altor imunoglobuline).

Sunt posibile și diverse combinații de leziuni renale. După cum arată practica, nefropatia este o consecință a patologiei limfoproliferative (mielom multiplu, leucemie limfocitară cronică, boala Waldenstrom etc.).

Când sunt eliberate în fluxul sanguin, ca toate proteinele cu o greutate moleculară de până la 40 kDa, lanțurile ușoare ocolesc filtrul renal, apoi se descompun în oligopeptide și aminoacizi prin intermediul lizozomilor. Excesul de lanțuri ușoare provoacă disfuncții ale reacției de catabolism și posibila eliberare de enzime lizozomale, ceea ce implică necroza țesutului tubular. Corpurile proteice duc la incapacitatea de reabsorbție, iar atunci când lanțurile ușoare monoclonale se combină cu proteina Tamm-Horsfall, se formează cilindri proteici în tubulii distali.

Proteina Bence Jones în boala mielomului

Mielomul multiplu este o afecțiune patologică în care organismul produce lanțuri ușoare de imunoglobuline în loc de lanțuri complete. Diagnosticul bolii și monitorizarea afecțiunii se efectuează prin analize de laborator ale urinei, care arată conținutul cantitativ de corp proteic. Specificarea subtipului de mielom se bazează pe analiza serului sanguin. Semnele clinice ale bolii includ: sindromul durerii osoase, disfuncția urinării, hematoame de origine necunoscută, retenția de lichide în organism.

Proteina Bence Jones în mielom este detectată pe baza unor teste standard care arată conținutul cantitativ al corpilor proteici și evaluează gradul de afectare renală. Identificarea proteinei în urină explică afectarea epiteliului cu scleroză a stromei renale, care în timp formează insuficiență renală - o cauză frecventă de deces ca urmare a afectării mielomului (proteina Bence Jones blochează complet tubulurile, împiedicând urinarea).

Datele statistice indică faptul că mielomul este diferențiat la bărbații cu vârsta peste 60 de ani, cu antecedente de predispoziție genetică, care suferă de obezitate și imunosupresie, precum și care au fost expuși la substanțe toxice și radioactive.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Determinarea proteinei Bence Jones

Pentru a diferenția o proteină specifică, se efectuează un studiu de laborator al porției medii de urină de dimineață (este necesar un volum de cel puțin 50 ml). Prezența proteinei Bence-Jones cu determinarea componentei cantitative este posibilă prin metoda imunofixării. Separarea proteinelor are loc prin electroforeză cu imunofixare ulterioară folosind seruri speciale. La legarea proteinei cu anticorpi ai lanțurilor ușoare și grele ale imunoglobulinelor, se formează complexe imune, care sunt evaluate prin colorare.

Trebuie menționat că până și concentrația minimă de proteină este detectată datorită reacției de precipitare la acidul sulfosalicilic. Proteina Bence-Jones se determină prin combinarea urinei filtrate (4 ml) cu tampon acetat (1 ml). Încălzirea ulterioară la 60º C într-o baie de apă și menținerea timp de 15 minute cu o probă pozitivă produce un sediment caracteristic. Această metodă este considerată cea mai fiabilă. Un mediu excesiv de acid sau alcalin și o densitate relativă scăzută a urinei pot afecta negativ rezultatele analizei.

Metodele de cercetare în care proteina Bence-Jones este dizolvată prin încălzire la 100º C sau precipitată din nou la răcire sunt nesigure, deoarece nu toate elementele proteice au caracteristicile corespunzătoare. Însă utilizarea hârtiei indicatoare este complet nepotrivită pentru detectarea proteinei Bence-Jones.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]