Analiza microscopică a sputei

Observarea la microscop a probelor de spută colorate native și fixe permite o examinare detaliată a structurii celulare, și o anumită măsură reflectă natura procesului patologic in plamani si bronhiile, activitatea sa, pentru a identifica formarea fibroase și cristaline diferite, de asemenea, au o valoare diagnostică importantă, și în cele din urmă să evalueze aproximativ starea flora microbiană a tractului respirator (bacterioscopie).

La o microscopie folosiți preparate native și vopsite de spută. Pentru a studia flora microbiană (frotiu) frotiu din spută sunt de obicei colorate cu Romanovsky-Giemsa, Gram și pentru detectarea Mycobacterium tuberculosis, dar Ziehl-Nielsen.

Elemente celulare și fibre elastice

Dintre elementele celulare care pot fi detectate în sputa de pacienți cu pneumonie, celule epiteliale, macrofage alveolare, leucocite și eritrocite sunt de importanță diagnostică.

Celule epiteliale. Epiteliu scuamos nu are de la gura,, pliurile vocale nazofaringe și valoarea diagnostică epiglotită, chiar dacă detectarea unui număr mare de celule scuamoase, de obicei , indică un eșantion redus de sputa calitate livrate la laborator și saliva care conțin impurități substanțiale.

La pacienții cu pneumonie, sputa este considerată adecvată pentru investigare dacă, cu o microscopie cu o creștere mică, numărul de celule epiteliale nu depășește 10 în câmpul vizual. Un număr mai mare de celule epiteliale indică o predominanță inacceptabilă a conținutului orofaringian în proba biologică.

Macrofagele alveolare, care, în cantități mici, pot fi găsite în orice spută sunt cușcă mai mari origine retikulogistiotsitarnogo localizate excentrică incluziuni abundente apropiate și nucleu în citoplasmă. Aceste incluziuni pot consta din macrofage absorbite de cele mai mici particule de praf (celule de praf), leucocite și altele asemenea. Numărul de macrofage alveolare crește cu procesele inflamatorii din parenchimul pulmonar și din căile respiratorii, inclusiv pneumonia.

Celulele epiteliului cilindric cilindrat acoperă membrana mucoasă a laringelui, traheei și bronhiilor. Ele arată ca niște celule alungite, lărgite la un capăt, unde se află nucleul și cilia. Celulele epiteliu ciliat cilindrice găsite în orice sputa, dar creșterea acestora indică leziuni mucoasa bronșică și trahee (acută și bronșită cronică, bronșiectazii, traheită, laringită).

Leucocitele în cantități mici (2-5 în câmpul vizual) se găsesc în orice spută. Atunci când inflamația țesutului pulmonar sau a mucoasei bronhice și a traheei, în special la supurație (gangrena, abces pulmonar, bronhiectază), numărul lor este crescut semnificativ.

Când se colorează preparatele de spută în conformitate cu Romanovsky-Giemsa, este posibilă diferențierea leucocitelor individuale, care uneori au o valoare importantă de diagnosticare. Astfel, atunci când sunt exprimate inflamații pulmonare sau bronhiale crește țesutul mucoasei ca numărul total de neutrofile și numărul de forme degenerative fragmentare a nucleelor și distrugerea citoplasmei.

O creștere a numărului de forme degenerative ale leucocitelor este cel mai important semn al activității procesului inflamator și a evoluției mai severe a bolii.

Eritrocite. Singurele eritrocite pot fi detectate practic și orice spută. O creștere semnificativă se observă atunci când permeabilitatea vasculară este afectată la pacienții cu pneumonie, cu distrugerea țesutului pulmonar sau bronhial, stagnarea într-un cerc mic al circulației, infarctul pulmonar etc. Într-un număr mare de celule roșii din sânge în spută se găsesc în timpul hemoptiziei oricărei geneze.

Fibre elastice. Un element suplimentar al fibrelor de plastic sputa care apar în spută atunci când se distruge țesutul pulmonar (abces pulmonar, tuberculoză, cancer pulmonar dezintegrat etc.) trebuie de asemenea menționat. Fibrele elastice sunt prezentate în spută sub formă de filamente subțiri cu două contururi, îndoite, cu diviziune dihotomă la capete. Apariția fibrelor elastice în spută la pacienții cu pneumonie severă indică apariția uneia dintre complicațiile bolii - abcesul țesutului pulmonar. În unele cazuri, în formarea abcesului pulmonar, fibrele elastice din spută pot fi detectate chiar mai devreme decât modificările radiografice corespunzătoare.

Adesea, cu pneumonie cronică, tuberculoză, actinomicoză, bronșită fibrină în preparate de spută, pot fi detectate fibrele fine de fibrină.

Semnele unui proces inflamator activ în plămâni sunt:

1. natura sputei (mucopurulentă sau purulentă);
2. o creștere a numărului de neutrofile din spută, inclusiv a formelor degenerative ale acestora;
3. o creștere a numărului de macrofage alveolare (de la un singur grup de mai multe celule din câmpul vizual și mai mult);

Apariția în spută a fibrelor elastice indică distrugerea țesutului pulmonar și formarea abcesului pulmonar.

Concluziile finale privind prezența și gradul de activitate a inflamației și distrugerii țesutului pulmonar se formează numai atunci când sunt comparate cu imaginea clinică a bolii și cu rezultatele altor metode de investigare pe bază de laborator și instrumentale.

[1], [2], [3], [4], [5]

Flora microbiană

Microscopia microscopică, colorată în conformitate cu Gram, și studiul florei microbiene (bacterioscopie) într-o parte a pacienților cu pneumonie permite tentativă stabilirea celui mai probabil agent cauzator al infecției pulmonare. Această metodă simplă de diagnosticare rapidă a agentului patogen nu este suficient de precisă și ar trebui utilizată numai în combinație cu alte metode (microbiologice, imunologice) de examinare a sputei. Implantarea cu microscopie a frotiurilor colorate este uneori foarte utilă pentru selectarea de urgență și administrarea unei terapii adecvate cu antibiotice. Cu toate acestea, trebuie avut în vedere posibilitatea de contaminare a conținutului bronșic al microflorei tractului respirator superior și a cavității bucale, mai ales atunci când colectarea sputei este incorectă.

Prin urmare, sputa este considerată adecvată pentru investigații ulterioare (bacterioscopie și examinare microbiologică) numai dacă îndeplinește următoarele condiții:

• Gramul gram din spută dezvăluie un număr mare de neutrofile (mai mult de 25 în câmpul vizual cu o mărire mică a microscopului);
• Numărul celulelor epiteliale, mai caracteristice pentru conținutul orofaringelui, nu depășește 10;
• în preparat există o predominanță de microorganisme de același tip morfologic.

La colorația Gram a sputei într-un frotiu, uneori, să fie suficient pentru a identifica gram pneumococi, streptococi, stafilococi și de grup de bacterii gram-negativ bun -. Klebsiellu, bagheta Pfeiffer, E. Coli și alte bacterii gram-pozitive în acest caz devin albastre, și Gram - roșu.

Agenți patogeni bacterieni ai pneumoniei

Gram-pozitive	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Stafilococii: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilus influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre frotiu sputa este cel mai simplu mod de verificare agent patogen pneumonie și are o valoare certă pentru selectarea terapiei cu antibiotice optime. De exemplu, atunci când detectează frotiurilor colorate Gram, diplococci grompolozhitelnyh (pneumococ) sau stafilococi în loc de antibiotice cu spectru larg, care sporesc riscul de selecție și propagarea microorganismelor aitibiotikorezistentnyh posibil să se atribuie terapiei directionate, active impotriva stafilococi sau pneumococi. In alte cazuri, detectarea florei dominante în frotiului Gram poate indica pas care cauzeaza pneumonia Enterobacteriaceae sunt gram-negativi (Klebsiella, E. Coli, etc.), care necesită o terapie țintită destinație corespunzătoare.

Cu toate acestea, concluzia tentativa agentului cauzal probabil infecției pulmonare prin microscopie se poate face pas numai pe baza creșterii semnificative a bacteriilor în spută, într - o concentrație de 10 ⁶ - de 10 ⁷  celule microbiene / ml sau mai mult (LL Vishnjakova). Concentrațiile mici de microorganisme (<10 ³  m.kg / ml) sunt caracteristice microflorei însoțitoare. Dacă concentrația celulelor microbiene variază de la 10 ⁴  10 ⁶  celule / ml microbiene, aceasta nu exclude rolul etiologic al acestui microorganism în apariția infecției pulmonare, dar nu o dovedesc.

De asemenea, trebuie amintit faptul că agenții patogeni intracelulari "atipici" (mycoplasma,  legionella, chlamydia, rickettsia) nu pată pe Gramm. În aceste cazuri, suspiciunea de a avea o infecție "atipică" poate să apară dacă frotiurile prezintă o disociere între un număr mare de neutrofile și un număr extrem de mic de celule microbiene.

Din păcate, metoda de bacterioscopie este în general destul de scăzută în sensibilitate și specificitate. Nu este o valoare predictivă, nici măcar pentru pneumococci bine văzuți, cu aproape 50%. Aceasta înseamnă că în jumătate din cazuri metoda dă rezultate fals pozitive. Acest lucru se datorează mai multe motive, dintre care unul este faptul că aproximativ o treime din pacienți înainte de spitalizare au primit antibiotice, care reduce foarte mult eficiența frotiu spută. Mai mult, chiar și în cazul rezultatelor pozitive ale studiului, indicând o concentrație suficient de mare în frotiu patogeni „tipice“ bacteriene (de exemplu pneumococic), nu se poate exclude complet prezența coinfecției „atipice“ patogeni intracelulari (mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Metoda de bacterioscopie a frotiurilor sputei, colorată de Gram, în unele cazuri ajută la verificarea agentului cauzator de pneumonie, deși are în general o valoare predictivă foarte scăzută. Formele patogene intracelulare atipice (micoplasma, legionella, chlamydia, rickettsia) nu sunt verificate deloc prin metoda bacterioscopiei, deoarece nu pată pe Gramm.

Trebuie menționată posibilitatea diagnosticării microscopice la pacienții cu pneumonie cu infecție pulmonară fungică. Cele mai relevante pentru pacienții cărora li se administrează tratament prelungit cu antibiotice cu spectru larg, este detectarea nativ sau microscopie de spută patate Candida albicans sub formă de celule de drojdie și de ramificare a miceliului. Acestea indică o schimbare în microflora conținutului traheobronchial, care apare sub influența tratamentului antibiotic, ceea ce necesită o corecție substanțială a terapiei.

În unele cazuri, la pacienții cu pneumonie, este necesară diferențierea bolii pulmonare existente cu tuberculoza. În acest scop, utilizați o culoare frotiu Ziehl-Nielsen, care, în unele cazuri, permite identificarea Mycobacterium tuberculosis, dar un rezultat negativ al unei astfel de investigații nu înseamnă lipsa de pacienti TB. Când colorarea sputei în conformitate cu Tsil-Nielsen, tuberculoza mycobacterium este colorată roșu și toate celelalte elemente ale sputei sunt albastre. Micobacteriile tuberculoase au aspectul de fecale, bastoane drepte sau ușor curbate de diferite lungimi cu îngroșări separate. Ele se află în pregătire în grupuri sau individual. Valoarea diagnosticului este detectarea în prepararea chiar a tuberculozei simple de micobacterii.

Pentru a crește eficiența detectării microscopice a tuberculozei micobacteriene, utilizați o serie de metode suplimentare. Cele mai frecvente dintre acestea este așa-numita metodă de flotație, în care sputa omogenizat agitat cu toluen, xilen sau benzen, care scade, la suprafață, mycobacterii de captare. După uscarea sputei, stratul superior este pipetat pe diapozitiv. Apoi, medicamentul este fixat și colorat de Tsilyu-Nielsen. Există și alte metode de acumulare (electroforeză) și microscopie a bacteriilor tuberculoase (microscopie luminiscență).

Examinarea microscopică (analiză) a sputei poate detecta mucus, elemente celulare, formațiuni fibroase și cristaline, ciuperci, bacterii și paraziți.

celulele

• Macrofagele alveolare sunt celule de origine reticulogistocite. Un număr mare de macrofage în spută sunt detectate în procesele cronice și în stadiul de rezolvare a proceselor acute în sistemul bronhopulmonar. Macrofagele alveolare care conțin hemosiderină (celule de defecte cardiace) sunt detectate cu un infarct ușor, hemoragie, stagnare într-un mic ciclu de circulație a sângelui. Macrofagele cu picături de lipide reprezintă un semn al procesului obstructiv în bronhii și bronhioles.
• Celulele Xantom (macrofagele grase) se găsesc în abces, actinomicoză, echinococcoză a plămânilor.
• Celulele epiteliului cilindric cilindric sunt celule ale membranei mucoase a laringelui, traheei și bronhiilor; ele se găsesc în bronșită, traheită, astm bronșic, neoplasme maligne ale plămânilor.
• Epiteliul plat este detectat atunci când scuipa intră în spută, nu are semnificație diagnostică.
• Leucocitele în una sau în alta cantitate sunt prezente în orice spută. Un număr mare de neutrofile sunt detectate în spută mucopurulentă și purulentă. Eozinofilele sunt bogate în spută în astm bronșic, pneumonie eozinofilică, leziuni la nivelul glottisului pulmonar și infarct pulmonar. Eozinofilele pot apărea în spută pentru tuberculoză și cancer pulmonar. Limfocitele în număr mare se găsesc în tuse convulsivă și, mai rar, în tuberculoză.
• Eritrocite. Detectarea celulelor roșii singulare în spută nu are importanță diagnostică. În prezența sângelui proaspăt în spută determinat eritrocite nemodificate, în cazul în care se mută de sânge spută, localizate la nivelul tractului respirator pentru o lungă perioadă de timp, a detecta eritrocitele levigat.
• Celulele tumorilor maligne se găsesc în neoplasme maligne.

fibre

• Fibrele elastice apar în degradarea țesutului pulmonar, care este însoțită de distrugerea stratului epitelial și de eliberarea fibrelor elastice; ele se regăsesc în tuberculoză, abces, echinococcoză, neoplasme în plămâni.
• Coroanele fibroase sunt detectate în bolile pulmonare cronice, cum ar fi tuberculoza cavernosă.
• Fibrele elastice calcinate sunt fibre elastice impregnate cu săruri de calciu. Detectarea acestora în spută este caracteristică defalcării petriritei tuberculoase.

Spirale, cristale

• Spiralele Kurshman se formează în starea spastică a bronhiilor și prezența mucusului în ele. În timpul tragerii tusei, mucusul vâscos este eliberat în lumenul unui bronh mai mare, răsucite într-o spirală. Spiralele Kurshman apar cu astm bronșic, bronșită, tumori pulmonare, comprimarea bronhiilor.
• Cristalele Charcot-Leiden sunt produsele degradării eozinofilelor. De obicei apar într-o spută care conține eozinofile; sunt caracteristice astmului bronșic, afecțiunilor alergice, infiltrațiilor eozinofile în plămâni, fluviilor pulmonare.
• Cristalele de colesterol apar cu abces, echinococcoza pulmonară, neoplasme în plămâni.
• Cristalele de hematoidină sunt caracteristice pentru abces și gangrena plămânului.
• Dusurile actinomictelor sunt detectate în actinomicoza plămânilor.
• Elementele echinococului apar cu echinococoza plămânilor.
• Plutele Dietrich - bucăți de culoare gri-gălbui, cu miros neplăcut. Acestea constau în detritus, bacterii, acizi grași, picături de grăsime. Acestea sunt tipice pentru un abces pulmonar și bronhiectazie.
• Tetraul lui Ehrlich constă din patru elemente: detrimentul calcificat, fibrele elastice calcifiate, cristalele de colesterol și tuberculoza micobacteriană. Apare în dezintegrarea concentrării tuberculare primare calcificate.

Miceliul și celulele fungice înmugurite apar în leziunile fungice ale sistemului bronhopulmonar.

Pneumocistul apare la pneumonie pneumocystis.

Sferulele de fungi sunt detectate în coccidioidomicoza plămânilor.

Larvele ascaride sunt detectate cu ascariasis.

Larvele ugristice intestinale sunt identificate cu tiroidoza.

Ouăle flukei pulmonare sunt identificate cu paragonimoză.

Elemente găsite în spută în astmul bronșic. Când astmul bronșic este de obicei separat de o cantitate mică de spută mucoasă, vâscoasă. Din punct de vedere macroscopic, puteți vedea spirala Kurshman. Când cercetarea microscopică este caracteristică prezenței eozinofilelor, epiteliului cilindric, există cristale de Charcot-Leiden.