Expert medical al articolului
Noile publicații
Southern blotting
Ultima examinare: 05.07.2025
Tot conținutul iLive este revizuit din punct de vedere medical sau verificat pentru a vă asigura cât mai multă precizie de fapt.
Avem linii directoare de aprovizionare stricte și legătura numai cu site-uri cu reputație media, instituții de cercetare academică și, ori de câte ori este posibil, studii medicale revizuite de experți. Rețineți că numerele din paranteze ([1], [2], etc.) sunt link-uri clickabile la aceste studii.
Dacă considerați că oricare dintre conținuturile noastre este inexactă, depășită sau îndoielnică, selectați-o și apăsați pe Ctrl + Enter.
Southern blotting (dezvoltată de E. Southern și R. Davis în 1975) este principala metodă utilizată în prezent pentru identificarea genelor unei anumite boli. Pentru a realiza acest lucru, ADN-ul este extras din celulele pacientului și tratat cu una sau mai multe endonucleaze de restricție. Fragmentele rezultate sunt supuse electroforezei, ceea ce permite separarea lor în funcție de dimensiune (fragmentele mai mici se mișcă mai repede prin porii gelului). Fragmentele sunt apoi transferate (reimprimate) pe un filtru de nitroceluloză, pe care este stratificată o sondă marcată radioactiv. Sonda se leagă doar de secvența complementară. Apoi, folosind autoradiografia, se determină poziția fragmentului dorit de ADN genomic pe electroferogramă.
Hibridizarea cu o sondă ADN marcată a preparatelor de ADN sau ARN aplicată prin picurare pe o matrice solidă fără restricție prealabilă și electroforeză se numește hibridizare punctuală sau cu fante, în funcție de configurația spotului de ADN de pe filtru (rotundă sau alungită, respectiv).
[