Hepatita C PCR

VHC este în mod normal absent în material.

Spre deosebire de metodele serologice de diagnosticare a hepatitei virale C, care detectează anticorpi anti-HCV, PCR permite detectarea directă a prezenței ARN-ului VHC și cuantificarea concentrației acestuia în materialul de testare. Testul are specificitate de specie și sensibilitate ridicată: zece molecule de ARN VHC în materialul de testare sunt suficiente pentru a-l detecta. Detectarea anticorpilor anti-HCV confirmă doar faptul infectării pacientului, dar nu permite evaluarea activității procesului infecțios (replicarea virusului) și a prognosticului bolii. În plus, anticorpii anti-HCV sunt detectați atât în sângele pacienților cu hepatită acută și cronică, cât și la acei pacienți care au fost bolnavi și s-au recuperat, iar adesea anticorpii din sânge apar la doar câteva luni după debutul tabloului clinic al bolii, ceea ce complică diagnosticul. Detectarea ARN-ului VHC în sânge folosind PCR este o metodă de diagnostic mai informativă. Detectarea ARN-ului VHC în PCR indică viremia, permite evaluarea replicării virusului în organism și servește drept unul dintre criteriile pentru eficacitatea terapiei antivirale. Detectarea ARN-ului VHC prin PCR în stadiile incipiente ale infecției virale, în absența completă a oricăror markeri serologici, poate servi drept cea mai timpurie dovadă a infecției. Cu toate acestea, detectarea izolată a ARN-ului VHC în absența completă a oricăror alți markeri serologici nu poate exclude complet un rezultat PCR fals pozitiv. În astfel de cazuri, este necesară o evaluare cuprinzătoare a studiilor clinice, biochimice și morfologice, cu confirmare multiplă repetată a prezenței infecției prin PCR.

Utilizarea metodei PCR la pacienții cu hepatită cronică virală C este de mare importanță, deoarece la majoritatea acestora nu există o corelație între prezența replicării virale și activitatea enzimelor hepatice. În astfel de cazuri, doar PCR ne permite să evaluăm prezența replicării virale, mai ales dacă rezultatul final este exprimat cantitativ. În majoritatea cazurilor de boală, dispariția ARN-ului VHC din serul sanguin are loc mai târziu decât normalizarea enzimelor hepatice, astfel încât normalizarea acestora nu poate servi drept bază pentru oprirea tratamentului antiviral.

Este important din punct de vedere practic să se examineze nu doar serul sanguin, ci și limfocitele și probele de hepatobiopsie folosind metoda PCR pentru a detecta ARN-ul VHC. Virusurile pot fi detectate de 2-3 ori mai des în țesutul hepatic decât în serul sanguin. Atunci când se evaluează rezultatele unui test de ser sanguin pentru ARN-ul VHC, trebuie reținut faptul că viremia poate fi fluctuantă (precum și modificările activității enzimatice). Prin urmare, după rezultate pozitive ale testului PCR, se poate obține un rezultat negativ și invers. În astfel de cazuri, este mai bine să se examineze probele de hepatobiopsie pentru a clarifica orice îndoieli care apar.

Detectarea ARN-ului VHC în materiale prin PCR este utilizată în următoarele scopuri:

• rezolvarea rezultatelor discutabile ale testelor serologice;
• diferențierea hepatitei virale C de alte forme de hepatită;
• identificarea stadiului acut al bolii în comparație cu infecția sau contactul anterior; determinarea stadiului de infecție al nou-născuților proveniți de la mame seropozitive pentru VHC;
• monitorizarea eficacității tratamentului antiviral.

Pacienți cu suspiciune de hepatită virală C:

• donatori;
• persoanele cu factori de risc;
• persoanele cu activitate ALT crescută;
• pacienți cu hepatită acută

Toate caracteristicile menționate mai sus ale evaluării rezultatelor și abordărilor pentru diagnosticarea VHC prin PCR se aplică și altor infecții.

Metoda PCR permite nu numai detectarea ARN-ului VHC în materialul studiat, ci și stabilirea genotipului acestuia. Determinarea genotipului virusului este de mare importanță pentru selecția pacienților cu hepatită virală cronică C pentru tratamentul cu interferon alfa și ribavirină. Indicațiile de laborator pentru tratamentul hepatitei virale cronice C cu interferon alfa sunt următoarele:

• activitate crescută a transaminazelor;
• prezența ARN-ului VHC în sânge;
• VHC genotip 1;
• viremie crescută în sânge (mai mult de 8×10⁵ ^copii /ml).

În prezent, este posibilă determinarea cantitativă a conținutului de ARN VHC din serul sanguin folosind metoda PCR, care este de mare importanță pentru monitorizarea tratamentului cu interferon alfa. Nivelul viremiei se evaluează după cum urmează: cu conținut de ARN VHC de la 10² ^la 10⁴ ^copii /ml - slab; de la ^{10⁵la 10⁷} copii /ml - mediu, peste ^10⁶ copii/ml - ridicat. Cu un tratament eficient, nivelul viremiei scade.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]