Metode imunologice de diagnosticare a bolilor ereditare

Recent, principalul complex de histocompatibilitate - HLA (Antigene Leucocitare Umane) a ajuns să fie considerat un important marker imunologic al geneticii populațiilor. Antigenele acestui sistem sunt determinate imunologic în leucocitele din sânge. Complexul genetic HLA este situat compact pe brațul scurt al cromozomului 6 (6p21.3). Localizarea acestui sistem și extinderea loci-urilor sale pe cromozom ne-au permis să calculăm că complexul constituie aproximativ 1/1000 din fondul genetic al organismului. Antigenele de histocompatibilitate participă la reglarea răspunsului imun al organismului, la menținerea homeostaziei imune. Datorită polimorfismului lor și localizării compacte a antigenelor HLA, acestea au dobândit o mare importanță ca marker genetic.

În prezent, au fost descoperite peste 200 de alele ale acestui sistem; este cel mai polimorfic și biologic semnificativ dintre sistemele genetice ale corpului uman. Tulburările diferitelor funcții ale complexului major de histocompatibilitate contribuie la dezvoltarea unui număr de boli, în principal autoimune, oncologice și infecțioase.

Conform localizării complexului HLA pe cromozomul 6, se disting următoarele loci: D/DR, B, C, A. Noi loci G, E, H, F au fost descoperiți relativ recent; rolul lor biologic este în prezent studiat activ. În complexul major de histocompatibilitate se disting trei clase de antigene. Antigenele din clasa I sunt codificate de locii A, B, C. Și noi loci aparțin acestei clase. Antigenele din clasa II sunt codificate de locii DR, DP, DQ, DN, DO. Genele din clasele I și II codifică antigene de transplant. Genele din clasa III codifică componentele complementului (C2, C4a, C4b, Bf), precum și sinteza izoformelor unui număr de enzime (fosfoglucomutază, glicoxilază, pepsinogen-5, 21-hidroxilază).

Prezența Ag asociată cu o anumită boală la o persoană ne permite să presupunem o predispoziție crescută la această patologie și, în unele corelații, dimpotrivă, rezistență la aceasta.

Determinarea antigenelor sistemului HLA se efectuează pe limfocite izolate din sângele periferic folosind seruri de histotipizare într-o reacție microlimfocitotoxică sau metode genetice moleculare.

Stabilirea legăturilor asociative între boli și antigenul complexului major de histocompatibilitate permite:

• identificarea grupurilor cu risc crescut de a dezvolta boala;
• determinarea polimorfismului său, adică identificarea grupurilor de pacienți cu caracteristici ale cursului sau patogenezei bolii; în acest sens, se poate efectua o analiză a sintropiei bolilor, identificând premisele genetice pentru combinarea diferitelor forme de patologie; asocierea cu antigene care determină rezistența la boli permite identificarea persoanelor cu un risc redus de a dezvolta această patologie;
• efectuarea diagnosticului diferențial al bolilor;
• determinarea prognosticului;
• dezvoltă tactici optime de tratament.

Întrucât majoritatea bolilor nu au o legătură directă cu antigenele complexului major de histocompatibilitate, a fost propusă teoria „celor două gene” pentru a explica asocierea dintre boli și antigenele HLA. Conform acestei teorii, există o genă (o gene) de răspuns imun (gena Ir) care este strâns asociată cu antigenele HLA și cu genele care reglează răspunsul imun. Genele protectoare determină rezistența la boli, iar genele provocatoare determină sensibilitatea la anumite boli.

Riscul relativ al bolii pentru indivizii cu genotipul corespunzător se calculează folosind formula: x = [hp _× (1 - hc ₎ ] / [hc _× (1 - _hp )], unde _hp este frecvența trăsăturii la pacienți, iar hc _este frecvența la indivizii din grupul de control.

Riscul relativ arată magnitudinea asocierii bolii cu un anumit Ag/Ag al sistemului HLA (dă o idee despre cât de multe ori este mai mare riscul de a dezvolta boala în prezența Ag comparativ cu absența acestuia). Cu cât acest indicator este mai mare la un pacient, cu atât este mai mare legătura asociativă cu boala.

Asocierea bolilor umane cu HLA-Ag (frecvența genelor, %)

Boli	HLA	Grup de control, %	Bolnav,%	Risc relativ
Reumatologie
Spondilita anchilozantă	B27	5-7	90-93	90-150
Sindromul Reiter	B27	6-9	69-76	32-49,6
Artrita cauzată de infecții:
- Yersinia	B27		58-76	17.59
- Salmonella	B27		60-69	17.57
Artrita psoriazică	B13		9-37	4,79
Artrita reumatoidă	Dw4	12-19	48-72	3,9-12,0
	DR4	20-32	70	4.9-9.33
Sindromul Behcet	B5	13	48-86	7,4-16,4
SKV	B5		11-34	1,83
	B8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26,4	57.1	3,80
	DR3	22.2	46,4	2,90
Sindromul Gougerot-Sjögren	B8		38-58	3.15
	Dw3	26	69-87	19.0
Cardiologie
IHD	B7	27,8	45,8	2.19
	B14	7,5	14,8	2.14
	B15	11.1	20.4	2.05
	Cw4	18,7	32,8	2.12
Hipertensiune arterială	B18	10.4	22,6	2,52
	Aw19	12.6	28.3	2,74
Endocrinologie
Diabetul de tip 1	B8	32	52-55	2.1-2.5
	B18		5-59	1,65
	B15	12	18-36	1,89-3,9
	Dw3	26	48-50	2,9-3,8
	Dw4	19	42-49	3,5-3,9
	DR3 DR3/DR4	20	60	6.10 33
Hipertiroidism	B8	21 de ani	35-49	2,34-3,5
	D3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Tiroidită subacută (de Quervain)	Bw35	13	63-73	16,81
	Dw1		33 de ani	2.1
Boala Addison	B8		20-80	3,88-6,4
	Dw3	26	70-76	8,8-10,5
Sindromul Itsenko-Cushing	A1		49	2,45
Gastroenterologie
Anemia pernicioasă	B7	19	26-52	1,7-3,1
	DR5	6	25	5.20
Gastrită atrofică	B7		37	2,55
Ulcer peptic al duodenului	A2	48.1	61,3	1.7
	A10	20,6	63,3	6,65
	B14	4.0	10.3	2,76
	B15	6.6	24,4	4,56
	B40	9,72	23.3	2,82
Hepatită autoimună	B8	16	37-68	2,8-4,1
	DR4	24	71	7,75
Purtători de HBsAg	Bw41		12	11.16
	B15		10-19	0,29

Boli	HLA	Grup de control, %	Bolnav,%	Risc relativ
Dermatologie
Psoriazis	Bw17	6-8	22-36	3,8-6,4
	B13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15	2.9
Dermatita herpetiformă	B8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16,60
Sclerodermie	B7	24	35 de ani	1.7
Pemfigus	A10			3.1
Dermatită atopică	B13	6,86	21.28	3,67
	B27	9,94	25,53	3.11
	A10/B13	0,88	8,51	10.48
Eczemă	A10	19,64	36,67	2.37
	B27	9,94	26,67	3.29
Urticarie și edeme Quincke	B13	6,86	21,21	3,65
	B5.8	1,42	12,12	9,57
	B5.35	0,71	6.06	9.02
Neurologie
Scleroză multiplă	A3	25	36-37	2,7-2,8
	B7	25-33	36-42	1.4-2.0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35 de ani	51.2	1,95
	DR3	20	32,5	1,93
Miastenie	B8	21-24	52-57	3,4-5,0
	A1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2,5
Pneumologie
Astm bronșic (la pacienți cu vârsta cuprinsă între 19 și 30 de ani)	B21	4,62	12,5	2,95
	B22	9,94	19,64	2.22
	B27	12.31	37,5	4.27
	B35	0,11	5.36	51,4
	B27/35	0,47	7.14	16.2
Alte boli
Rinită vasomotorie	A3	26,98	52,38	2,98
	B17	7,57	28,57	4,88
	A3/10	2,72	23,83	11.18
	B7/17	0,47	9.52	22.28

Datele prezentate în tabel arată că cele mai puternice legături asociative se găsesc în cazul bolilor cu transmitere poligenică sau multifactorială.

Astfel, determinarea antigenelor complexului major de histocompatibilitate de pe celulele sanguine (leucocite) ne permite să identificăm gradul de predispoziție individuală a unei persoane la o anumită boală și, în unele cazuri, să folosim rezultatele cercetării pentru diagnosticul diferențial, evaluarea prognosticului și selectarea tacticilor de tratament. De exemplu, detectarea antigenelor HLA-B27 este utilizată în diagnosticul diferențial al bolilor autoimune. Aceasta este detectată la 90-93% dintre pacienții din rasa caucaziană cu spondilită anchilozantă și sindrom Reiter. La reprezentanții sănătoși ai acestei rase, antigenele HLA-B27 sunt detectate doar în 5-7% din cazuri. Antigenele HLA-B27 sunt adesea detectate în artrita psoriazică, bolile inflamatorii intestinale cronice care apar cu sacroileită și spondilită, uveită și artrită reactivă.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]