Virusul hepatitei E

Virusul hepatitei E (HEV) are o formă sferică, cu un diametru de 27-34 nm, simetria nucleocapsidei este icosaedrică, nu există membrană externă.

Virusul hepatitei E a fost identificat în fecalele pacienților care au avut hepatită virală non-A, non-B pe cale enterală de infecție, precum și în fecalele animalelor experimentale (maimuțe) infectate cu același material care conține virus, utilizând microscopia electronică imună (MIE) cu ser de la convalescenți ai acestei hepatite.

Până în prezent, s-a stabilit că virusul hepatitei E are următoarele caracteristici fizico-chimice și biologice.

• Morfologic, este reprezentat de particule sferice fără înveliș; suprafața lor prezintă vârfuri și depresiuni; virusul se dezintegrează la expunerea la CS CL, congelare/dezghețare și se păstrează la -20 °C.
• Diametrul particulelor virale este cuprins între 32 și 34 nm.
• Genomul este reprezentat de ARN monocatenar, poliadenilat, cu lungimea de 7,5 kb.
• Coeficientul de sedimentare este de 183 S (pentru particulele defective asemănătoare virusurilor - 165 S). Densitatea flotabilă este de 1,29 g/cm3 ^în gradientul KTa/Glu.
• Cultivarea in vitro a fost nereușită.
• Administrarea intracerebrală a unei suspensii de extract fecal care conține particule de HEV la șoareci care sugă nu provoacă boală la aceștia.

Prin clonarea moleculară, s-au obținut cantități mari de HEV din bila maimuțelor macac infectate. A fost demonstrată identitatea particulelor virale obținute din extractele fecale ale pacienților cu hepatită E din diferite regiuni ale lumii (Somalia, Borneo, Pakistan, Asia Centrală etc.). Structura genomului HEV a fost practic descifrată. Prin analiza secvențelor nucleotidice și a organizării genomului, s-a stabilit că HEV diferă de picornavirusuri și că nu poate aparține calicivirusurilor (calicivirusuri), așa cum s-a presupus inițial.

Genomul este reprezentat de un ARN pozitiv monocatenar, nefragmentat, de 7500 de baze, care conține trei cadre de citire deschise care codifică proteine specifice virusului. Pe suprafața virionului există depresiuni asemănătoare cupelor (caliciul grecesc), prin urmare virusul a fost inițial inclus în familia Caliciviridae (genul Hepavirus). Un studiu mai detaliat al genomului HEV a arătat că secvența nucleotidică a ARN-ului său este unică și are doar o oarecare similaritate cu virusul rubeolei.

HEV este clasificat în prezent ca membru al familiei Hepereviridae, genul Heperevirus, virusul hepatitei E.

Antigenul(ii) HEV - Ag HEV a fost identificat pe suprafața particulelor virale utilizând microscopia electronică imună, în hepatocite - prin metode imunohistochimice. La animalele experimentale (macaci și cimpanzei) care suferă de hepatita E, Ag HEV a fost detectat în citoplasma hepatocitelor utilizând metoda imunofluorescenței prin stratificarea secțiunilor hepatice cu seruri de la aceleași animale obținute în perioada de convalescență; specificitatea Ag HEV a fost confirmată ulterior în studii de absorbție utilizând proteine recombinante obținute prin clonarea genomului HEV.

În studiile imunomorfologice efectuate pe maimuțe infectate cu hepatita E, depozitele granulare de Ag HEV au fost localizate în citoplasma hepatocitelor, granulele conținând Ag HEV fiind amplasate aleatoriu, iar numărul de granule variind semnificativ în diferite celule. Nu a fost detectată nicio localizare preferențială a hepatocitelor Ag HEV pozitive în nicio zonă particulară a lobulului hepatic. Hepatita care conține Ag HEV a fost detectată constant înainte de creșterea activității ALT, apoi a persistat pe întreaga perioadă de hiperenzimemie și a dispărut practic după normalizarea activității ALT.

Secvențele genomice ale HEV au fost identificate în fecale, bilă și ser sanguin al pacienților cu hepatită E la oameni și animale experimentale (maimuțe); răspunsul imun umoral a fost studiat de la stadiul acut al bolii până la convalescență.

Cea mai mare concentrație de particule HEV a fost detectată în bila macacilor infectați înainte de vârful activității ALT în stadiul de infecție, când s-a înregistrat vârful prezenței Ag HEV în ficat.

ARN-ul HEV a fost găsit în probe fecale, bilă și ser de la oameni și primate infectate.

Prezența anticorpilor specifici (anti-HEV) în serul sanguin al pacienților cu hepatită E la oameni și animale experimentale a fost stabilită utilizând microscopia electronică imună și metoda cu anticorpi fluorescenți, utilizând preparate de particule HEV sau secțiuni hepatice conținând Ag HEV ca substrat.

Studii transversale ulterioare ale izolatelor de HEV și serurilor de convalescență obținute de la pacienți din diferite regiuni geografice în care au apărut focare sau cazuri sporadice de hepatită E, precum și ale particulelor și serurilor de HEV obținute de la primate infectate cu aceste izolate, i-au convins în cele din urmă pe cercetători că există un singur virus (sau o clasă de virusuri înrudite serologic) responsabil la nivel mondial pentru hepatita E.

Este prezentată diversitatea genotipică a HEV. Au fost identificate opt genotipuri ale virusului, principalele prototipuri fiind următoarele izolate: genotipul 1 - izolat HEV din Birmania, 2 - din Mexic, 3 - din SUA, 4 - din Taiwan și China, 5 - din Italia, 6 - din Grecia, 7 - din Grecia (al doilea izolat), 8 - din Argentina.

S-a demonstrat că în stadiul acut al hepatitei E la macaci și cimpanzei, în serul sanguin circulă anticorpi din clasele IgM și IgG anti-HEV, în timp ce în serurile din perioada de convalescență circulă doar anticorpi din clasele IgM și IgG anti-HEV.

Într-o serie de studii, IgM anti-HEV a fost detectat la 73% dintre pacienții cu hepatită E în primele 26 de zile de la debutul icterului; în perioada de recuperare, IgG anti-HEV a fost detectat la 90% dintre pacienți.

Sursa de infecție o reprezintă doar oamenii, agentul patogen fiind excretat prin fecale. Mecanismul de infecție este fecal-oral. Principala cale de infecție este prin apa contaminată cu fecale. Doza infecțioasă este semnificativ mai mare decât cea a virusului hepatitei A. Sensibilitatea la virusul HEV este universală. Epidemiile pot afecta zeci de mii de oameni dacă regimul de consum de alcool este încălcat, în special în timpul muncii sezoniere din vară și toamnă.

Clinic, hepatita E este mai ușoară decât hepatita A și nu s-a observat trecerea la o formă cronică. La 85-90% dintre pacienți, hepatita E este ușoară sau moderată, adesea asimptomatică. Cu toate acestea, la femeile însărcinate, hepatita E este severă, cu o rată a mortalității de până la 20%.

Microscopia electronică imună este utilizată pentru diagnostic; a fost propus un sistem de testare pentru detectarea anticorpilor împotriva antigenelor HEV. Imunitatea post-infecție este puternică, durează toată viața și se datorează anticorpilor neutralizanți ai virusului și celulelor de memorie imună. A fost propus un vaccin cu virioni întregi pentru profilaxie specifică, iar vaccinurile vii și recombinante sunt în curs de dezvoltare.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]