Salmonella - agenți patogeni de tifoid și paratifoid

Febră tifoidă - acută severă boală infecțioasă caracterizată prin intoxicație generală profundă, bacteriemie și un aparat specific limfatic intestinal. Intoxicarea se manifestă prin dureri de cap severe, confuzie, delir (tifos din tifosul grecesc - ceață). Febra tifoida ca o unitate independentă nosologică , pentru prima dată a încercat să izoleze medic rus AG Pyatnitskii înapoi în 1804, dar în cele din urmă a făcut în 1822 R. Breton, care diferențiază această boală de tuberculoză intestinală și a sugerat natura contagioasă a febrei tifoide.

Agentul cauzal al febrei tifoide - Salmonella typhi - a fost descoperit în 1880 de către K. Ebert și izolat în cultura pură în 1884 de K. Gaffki. Curând patogeni au fost izolate și studiate germen A și B - S. Paratyphi A si S. Paratyphi B. Genul Salmonella include un grup mare de bacterii, dar numai trei dintre ele - S. Typhi, S. Paratyphi A si S. Paratyphi B - cauza unei boli la o persoană cu o imagine clinică a febrei tifoide. Din punct de vedere morfologic, ele nu pot fi distinse: tije gram-negative scurte cu capete rotunjite, lungime 1-3,5 microni, diametru 0,5-0,8 microni; sporii și capsulele nu se formează, au mobilitate activă (peritrichi). Conținutul de G + C din ADN este de 50-52% mol.

Agenții cauzali ai tifoidului și paratifoidului sunt anaerobii facultativi, un optim de temperatură pentru o creștere de 37 ° C (dar poate crește în intervalul de la 10 la 41 ° C), pH 6,8-7,2; nu sunt exacte pentru mediul nutritiv. Creșterea pe bulion este însoțită de turbiditate, pe MPA, se formează colonii netede, netede, translucide cu un diametru de 2-4 mm. Cu toate acestea, coloniile S. Typhi care au un antigen Vi sunt tulbure. Colonii S. Paratyphi În mai grosier, după câteva zile, ele formează de-a lungul periferiei rolele lor. În mediile Endomo, coloniile celor trei salmoneli sunt incolore, pe bismut-sulfitagar - negru. În cazul disocierii pe medii dense, coloniile formelor R cresc. Mediul selectiv pentru agenții cauzali ai febrei tifoide și a paratifoidului este bulionul biliar sau bilă.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Proprietățile biochimice ale agenților patogeni de tifoid și paratifoid

Patogenilor tifoidă și paratifoidă dau o reacție pozitivă cu MR, nu formează indol nu gelatină lichefiat, nitrați redus la nitriți, nu formează acetoină. S. Typhi nu crește pe agar foame cu citrat. Principalele diferente biochimice intre patogeni tifoide si paratifoidă ajuns la concluzia ca S. Typhi unele fermenților glucoza si alti carbohidrati pentru a forma acidul numai, un S. Paratyphi A si S. Paratyphi B - și pentru a forma acid și gaz.

S. Typhi asupra capacității de fermentare a xilozelor și arabinozelor sunt împărțite în patru tipuri biochimice: I, II, III, IV.

Xiloză + - + -

Arabinoză - - + +

[7], [8], [9], [10],

Structura antigenică a agenților patogeni de tifoid și paratifoid

Salmonellale au antigeni O și H. Pe antigenele O se împart în numeroase serogrupuri și în funcție de antigeni H în serotipuri (pentru mai multe detalii despre clasificarea serologică a salmonelei, a se vedea secțiunea următoare). S. Typhi, S. Paratyphi A și S. Paratyphi B diferă una de cealaltă, atât în ceea ce privește antigeni O (aparțin serogrupurilor diferite) cât și antigeni H.

În 1934, A. Felix și R. Pitt au stabilit că S. Typhi, pe lângă antigenii O și H, are un alt antigen de suprafață, pe care l-au numit antigenul de virulență (antigenul Vi). În funcție de natura chimică a Vi-antigen este diferit de O și antigeni H este format din trei fracțiuni diferite, dar baza sa este N-polimer de acid complex atsetilgalaktozaminouronovaya cu m. M. 10 MD. Vi-antigen detectat de obicei în culturile proaspăt izolate, dar este ușor de pierdut sub influența diferiților factori (în special, atunci când este crescută la o temperatură de peste 40 ° C și sub 20 ° C, în medii conținând acid carbolic și m. N.) la depozitarea îndelungată a culturilor, este distrusă la temperatura de 100 ° C timp de 10 minute. Deoarece este situat mai superficial decât O-antigen, prezența acestuia previne cultura aglutinare S. Typhi ser O-specific, deci o cultură verificată în mod necesar la aglutinarea cu Vi-ser. Dimpotrivă, pierderea antigenului Vi duce la eliberarea antigenului O și la restabilirea aglutinării O, dar se pierde aglutinarea Vi. Conținutul cantitativ al antigenului Vi în S. Typhi poate varia foarte mult, prin urmare F. Kauffmann a propus clasificarea S. Typhi în funcție de conținutul antigenului Vi în trei grupe:

• forme pure v (viel multiplu);
• forme pure w (germană wenig - puțin);
• forme intermediare vw.

S-au găsit trei mutanți neobișnuit de S. Typhi: forma Vi-I-R, celulele nu au antigeni H și O, dar rețin antigenul Vi persistent; O-901 - lipsit de antigeni H și Vi; H-901 - conține antigeni O și H, dar este lipsit de antigenul Vi. Toți cei trei antigeni: O-, H- și Vi- au proprietăți imunogene pronunțate. Prezența antigenelor Vi permite culturii de S. Typhi să fie tastat cu fag. Există 2 tipuri de fagi care lizează numai acele culturi care conțin antigenul Vi: Vi-I este fagul universal, liză majoritatea culturilor S. Typhi care conțin Vi; și un set de fagi Vi-II care lizează selectiv cultura S. Typhi. Aceasta a fost pentru prima dată prezentată în 1938 de către J. Craig și K. Ian. Cu ajutorul vi-fagilor de tip II, ei au împărțit S. Typhi în 11 tipuri de fagi. În 1987, au fost identificate 106 tipuri diferite de vi-fagi de S. Typhi. Sensibilitatea lor la fagii corespunzători este un semn stabil, prin urmare fagotiparea are o importantă semnificație epidemiologică.

Schemele de fagotipare a S. Paratyphi A și S. Paratyphi B au fost de asemenea dezvoltate, conform cărora ele sunt împărțite în zeci de fagotipi. Este semnificativ faptul că fagotipurile de salmonelă nu pot fi diferite în vreun alt mod.

[11], [12], [13], [14],

Rezistența agenților patogeni de tifoid și paratifoid

Patogenilor tifoidă și paratifoidă în mediu (apă, sol, praf) sunt stocate, în funcție de condițiile, de la câteva zile la câteva luni. Apa curgătoare poate supraviețui până la 10 zile, congestiva - până la 4 săptămâni, la legume și fructe -. 5-10 zile pe feluri de mâncare - până la 2 săptămâni, în unt, brânză -. 3 luni, pe gheață - până la 3 luni . și mai mult; încălzirea la o temperatură de 60 ° C ucide în 30 de minute, și fierbere - instantaneu. Dezinfectanții chimici convenționali le ucid în câteva minute. Apa de la robinet conține clor la o doză de 0,5-1,0 mg / l sau ozonizare apă asigură dezinfectarea acestuia fiabilă atât Salmonella și alte bacterii enterice patogene.

Factori patogeni ai agenților patogeni de tifoid și paratifoid

Cea mai importantă caracteristică biologică a agenților cauzali ai febrei tifoide și a paratifoidului A și B este capacitatea lor de a rezista la fagocitoză și de a se multiplica în celulele sistemului limfoid. Ele nu formează exotoxine. Factorul principal al patogenității lor, pe lângă antigenul Vi, este endotoxina, care se caracterizează prin toxicitate neobișnuit de ridicată. Factori de patogenitate precum fibrinolizin, plazmokoagulaza, hialuronidaza și Lecithinase t. N., se găsesc în agenții patogeni ai tifoide germen foarte rare. Cea mai mare frecvență se găsește în ADN-ase (75-85% din culturile S. Typhi studiate și S. Paratyphi B). S-a stabilit că tulpinile de S. Typhi având o plasmidă cu 6 mM sunt mai virulente. Prin urmare, problema factorilor patogeni ai acestor salmonella rămâne să fie studiată.

[15], [16], [17],

Imunitate postinfecțioasă

Bolile durabile, prelungite, repetate, de tifoid și paratifoid sunt rare. Imunitatea este cauzată de apariția anticorpilor la antigeni Vi, O și H, celulele de memorie imună și activitatea crescută a fagocitelor. Imunitatea postvaccinală, spre deosebire de postinfecție, este de scurtă durată (aproximativ 12 luni).

Epidemiologia tifoidului și a paratifoidului

Sursa febrei tifoide și a paratifoidului A este doar o persoană, un bolnav sau un purtător. Sursa paratifoidului B, în afară de om, poate fi și animale, inclusiv păsări. Mecanismul de infectare este fecal-oral. Doza infectantă de S. Typhi de 105 celule (provoacă o boală de 50% din voluntari), infectând dozele de salmonelă de paratifoid A și B este mult mai mare. Infecția are loc în principal ca urmare a contactului direct sau indirect, precum și prin apă sau alimente, în special lapte. Cele mai mari epidemii au provocat infecții cu agenți patogeni (epidemii de apă).

[18], [19], [20], [21], [22],

Simptomele de tifoid și paratifoid

Perioada de incubație pentru febra tifoidă este de 15 zile, dar poate varia de la 7 la 25 de zile. Aceasta depinde de doza infectantă, de virulența agentului patogen și de starea imună a pacientului. Patogenia și imaginea clinică a febrei tifoide și a paratifoidului A și B sunt foarte asemănătoare. În dezvoltarea bolii, se dezvăluie în mod clar următoarele etape:

• etapa de invazie. Agentul cauzal penetrează prin gură în intestinul subțire;
• prin căile limfatice Salmonella intra în formațiunile limfoide mici submucoasa intestinului (patch-uri Peyer și foliculii solitare) și a le reproduce, cauza limfangita si limfadenita (granule abdominale-tifoide originale);
• bacteremia - ieșirea agentului patogen în cantități mari în sânge. Etapa de bacteremie începe la sfârșitul perioadei de incubație și poate (în absența tratamentului eficient) să continue în întreaga boală;
• stadiul de intoxicare apare datorită decăderii bacteriilor sub acțiunea proprietăților bactericide ale sângelui și a eliberării de endotoxine;
• etapa de difuzie parenchimală. Din sânge, salmonela este absorbită de macrofagele măduvei osoase, splinei, ganglionilor limfatici, ficatului și altor organe. Un număr mare de agent cauzator al febrei tifoide se acumulează în canalele biliare ale ficatului și vezicii biliare, în cazul în care se găsește condiții favorabile pentru reproducerea lor și în cazul în care proprietățile bactericide ale sângelui slăbit influența bilei;
• stadiul alergiei excretorii. Deoarece formarea imunității începe procesul de eliberare de la agentul patogen. Acest proces este efectuat de toate glandele: salivar, intestine, sudoare, lactate (în timpul hrănirii copilului), sistemul urinar și, în special, activ - ficatul și vezica biliară. Salmonella eliberată din vezica biliară intră din nou în intestinul subțire, din care o parte este excretată cu fecale și unii invadează din nou în ganglionii limfatici. Introducerea secundară în nodurile deja sensibilizate determină o reacție hipereergică în ele, care se manifestă sub forma necrozei și formării ulcerelor. Această etapă este periculoasă datorită posibilității de perforare a peretelui intestinal (ulcere), a sângerărilor interne și a dezvoltării peritonitei;
• etapa de recuperare. Procesul de vindecare a ulcerelor are loc fără apariția cicatricelor deformante la sol, curățate de raidurile necrotice.

La rândul lor, în imaginea clinică a bolii, se disting următoarele perioade:

• I etapă inițială - stadiu incrementi (prima săptămână): o creștere treptată a temperaturii la 40-42 ° C, o creștere a intoxicației și a altor manifestări ale bolii.
• II - stadiul de dezvoltare maximă a tuturor simptomelor - stadiu acme (2-3 săptămâni de boală): temperatura este menținută la un nivel ridicat;
• III - stadiul recesiunii bolii - al patrulea decrementi (săptămâna a patra a bolii): scăderea treptată a temperaturii și scăderea manifestării altor simptome;
• IV - etapa de recuperare.

Boli 8-9 zile, și, uneori, mai târziu, mulți pacienți apar erupții cutanate roseolous pe pielea de pe abdomen, piept și spate. Erupția cutanată (mici pete roșii), este o consecință a proceselor productive și inflamatorii locale ale naturii alergice în straturile superficiale ale pielii din jurul vaselor limfatice, care conțin agenți patogeni abundent. Recuperarea clinică nu coincide întotdeauna cu cea bacteriologică. Aproximativ 5% din pacienți devin purtători cronici de salmonella tifos sau paratifoid. Motivele care stau la baza pe termen lung (mai mult de 3 luni, și, uneori, de ani) purtători de Salmonella, rămân neclare. O valoare cunoscută în purtătoare formarea jucat de inflamație locală în bilă (uneori urinar) ale tractului care apar adesea în legătură cu febra tifoidă, infecții germen sau exacerbate ca rezultat al acestor infecții. Cu toate acestea, un rol la fel de important în formarea de purtător lung Salmonella tifoide paratifoidă A și B joacă L-transformarea acestora. În formă de L Salmonella își pierd H- și parțial 0-Vi-antigeni sunt de obicei localizate, intracelulară (în macrofage de măduvă osoasă), și, prin urmare, nu sunt disponibile fie pentru chimioterapie sau pentru anticorpi și pot persista în organism mult timp persoana bolnavă. Revenind la forma originală și complet recuperarea structurii salmonella antigenice devin din nou virulente din nou pătrund în canalele biliare, exacerbează procesul de bacterii, sunt excretate prin fecale și, astfel purtătorul devine o sursă de infecție pentru alții. De asemenea, este posibil ca formarea transportului bacterian să depindă de un anumit deficit al sistemului imunitar.

Diagnosticul de laborator pentru tifoid și paratifoid

Cea mai veche și principală metodă de diagnosticare a tifoidului și a paratifoidului este bacteriologică - obținerea culturii de sânge sau a mieloculturii. În acest scop, examinați sângele sau măturați măduva osoasă. Sânge mai bine semăna pe mediu Rapoport (bulion colic suplimentat cu indicator de glucoza si sticla float) într-un raport de 1:10 (10 ml de mediu 1 ml de sânge). Semănatul trebuie incubat la 37 ° C timp de cel puțin 8 zile și ținând seama de posibila prezență a formelor L - până la 3-4 săptămâni. Pentru sunt utilizate identificarea culturilor izolate de Salmonella (pe baza proprietăților lor biochimice) seruri adsorbite de diagnostic care conțin anticorpi la antigeni 02 (S. Paratyphi A), 04 (S. Paratyphi B) și 09 (S. Typhi). Dacă cultura izolată de S. Typhi nu este aglutinată cu ser 09, trebuie verificată cu serul Vi.

Pentru a izola S. Typhi, este posibil să se utilizeze exudatul, obținut prin scarificarea roseoloculturilor de roseol.

Examenul bacteriologic al fecale, urina si bila se face pentru a confirma diagnosticul, monitorizarea, recuperarea bacteriologice la convalescenți de descărcare și pentru diagnosticul de bacterii. În acest caz, materialul însămânțate anterior în medii de îmbogățire (chimicale media care conțin, cum ar fi selenit, care inhibă creșterea E. Coli și alți reprezentanți ai florei intestinale, dar nu inhibă creșterea Salmonella) și apoi cu mediul imbogatirea - pentru mediu de diagnosticare diferențială ( Endo, sulfitagar de bismut) pentru a izola coloniile izolate și pentru a obține de la acestea culturi pure identificate prin schema de mai sus. Pentru a detecta și O- Vi-antigen în ser și scaune de pacienți pot fi utilizate DGC TPHA cu diagnosticum anticorp, reacția koagglyutinatsii unitate-hemaglutinare, OFIs. Pentru identificarea accelerată a S. Typhi, se promite să se utilizeze ca o probă un fragment ADN care poartă gena antigenului Vi (timp de identificare 3-4 ore).

De la sfârșitul prima săptămână de boală la pacienții cu anticorpi serici apar, test de reacție tub aglutinare, prin urmare, pentru diagnosticul de febră tifoidă în 1896, F. Vidal a fost propusă este dislocat. Dinamica anticorpilor la S. Typhi este unică: în primul rând apar anticorpi pentru antigenul O, dar titrul lor scade rapid după recuperare; Anticorpii H apar mai târziu, dar persistă după boli și vaccinări de ani de zile. Ținând cont de aceasta, reacția este pus Vidal simultan separarea O- și N-diagnosticums (și, de asemenea, diagnosticums germen A și B), pentru a evita eventualele erori datorate imunizării transferate sau boli anterior. Cu toate acestea, specificitatea reacției Widal nu este suficient de mare, astfel încât aplicația preferată TPHA transformat, în care diagnosticum eritrocit sensibilizat sau (anticorp O-detecție) O-, sau Vi-antigen (pentru a detecta Vi-anticorpi). Cea mai fiabilă și mai specifică este ultima reacție (Vi-hemaglutinare).

Diagnosticul efectuării bacteriilor de tifoid și paratifoid

Singura dovadă este izolarea bacteriilor din mediul de cultură S. Typhi, S. Paratyphi A, S. Paratyphi C. Materialul pentru studiu sunt conținutul duodenal, fecale și urină. Complexitatea problemei constă în faptul că purtătorii nu expun întotdeauna cu aceste substraturi, există pauze și destul de lungi. Ca metode subsidiare care permit gamă restrânsă de persoane chestionate utilizeaza teste serologice (detecție simultană O-, H-, sau O VI, Vi-anticorpi indică posibila prezență a agentului patogen în organism) și testul alergic pielii cu Vi-Tifina River. Acesta din urmă conține antigenul Vi, care, atunci când interacționează cu anticorpii Vi, dă o reacție alergică locală sub formă de înroșire și umflare timp de 20-30 de minute. O reacție pozitivă cu vi-tifină indică prezența anticorpilor Vi în organism și prezența posibilă a S. Typhi. Pentru a identifica L-formele de S. Typhi, sunt propuși anticorpi imunofluorescenți speciali (la antigeni L-forma ai agentului patogen). V.Murom a oferit o metodă originală pentru detectarea transportatorilor bacterieni. Constă în studiul tampoanelor, simultan aruncate în trapele de canalizare din toată rețeaua de canalizare a localității.

[23], [24], [25], [26], [27], [28]

Tratamentul tifoidului și paratifoidului

Tratamentul febrei tifoide se bazează pe folosirea diferitelor antibiotice, la care agenții patogeni prezintă sensibilitate ridicată (levomicină, ampicilină, tetracicline, etc.). Antibioticele reduc severitatea cursului bolii și își scurtează durata. Cu toate acestea, transferul de plasmide R la salmonela din E. Coli sau alte enterobacterii poate duce la apariția unor clone epidemice periculoase printre acestea.

Profilaxia specifică a tifoidului și a paratifoidului

În loc de șapte vaccinuri tifoide diferite, folosite anterior, începând din 1978, doar unul a fost produs în țara noastră - un produs chimic sorburat abdominal-tifoid monovalent. Cu toate acestea, datorită faptului că epidemia tifoidă a bolii sa mutat în categoria de sporadice (iar acest lucru a fost posibil în primul rând datorită îmbunătățite de apă și a sistemelor de canalizare și îmbunătățirea culturii sanitare a populației), nevoia de imunizare în masă împotriva lui au dispărut. Prin urmare, inocularea febrei tifoide se efectuează numai în cazul indicațiilor epidemice.