Expert medical al articolului
Noile publicații
Reacția în lanț a polimerazei (PCR) în diagnosticul bolilor infecțioase
Ultima examinare: 05.07.2025
Tot conținutul iLive este revizuit din punct de vedere medical sau verificat pentru a vă asigura cât mai multă precizie de fapt.
Avem linii directoare de aprovizionare stricte și legătura numai cu site-uri cu reputație media, instituții de cercetare academică și, ori de câte ori este posibil, studii medicale revizuite de experți. Rețineți că numerele din paranteze ([1], [2], etc.) sunt link-uri clickabile la aceste studii.
Dacă considerați că oricare dintre conținuturile noastre este inexactă, depășită sau îndoielnică, selectați-o și apăsați pe Ctrl + Enter.
PCR este una dintre metodele de diagnostic ADN care permite creșterea numărului de copii ale secțiunii detectate a genomului (ADN) al bacteriilor sau virusurilor de milioane de ori folosind enzima ADN polimerază. Secțiunea testată de acid nucleic specifică unui anumit genom este multiplicată (amplificată) de mai multe ori, ceea ce permite identificarea acesteia. Mai întâi, molecula de ADN a bacteriilor sau virusurilor este împărțită în două lanțuri prin încălzire, apoi, în prezența primerilor ADN sintetizați (secvența nucleotidică este specifică genomului determinat), aceștia se leagă de secțiuni complementare de ADN, iar al doilea lanț de acid nucleic este sintetizat după fiecare primer în prezența ADN polimerazei termostabile. Se obțin două molecule de ADN. Procesul se repetă de mai multe ori. O moleculă de ADN, adică o bacterie sau o particulă virală, este suficientă pentru diagnostic. Introducerea unei etape suplimentare în reacție - sinteza ADN-ului pe o moleculă de ARN folosind enzima transcriptază inversă - a făcut posibilă testarea virusurilor ARN, cum ar fi virusul HCV. PCR este un proces în trei etape care se repetă ciclic: denaturare, recoacere a primerului, sinteza ADN-ului (polimerizare). Cantitatea de ADN sintetizată este identificată prin ELISA sau electroforeză.
PCR poate utiliza diverse materiale biologice - ser sau plasmă sanguină, prelevare de probe de uretră, biopsie, lichid pleural, lichid cefalorahidian etc. PCR este utilizat în principal pentru diagnosticarea bolilor infecțioase precum hepatita virală B, hepatita virală C, hepatita virală D, infecția cu CMV, infecțiile cu transmitere sexuală (gonoree, chlamydia, micoplasma, infecțiile cu ureaplasma), tuberculoza, infecția cu HIV etc.
Avantajul PCR în diagnosticarea bolilor infecțioase față de alte metode de cercetare este următorul:
- agentul infecțios poate fi detectat în orice mediu biologic al organismului, inclusiv în materialul obținut în timpul unei biopsii;
- este posibilă diagnosticarea bolilor infecțioase în stadiile incipiente ale bolii;
- este posibilă evaluarea cantitativă a rezultatelor cercetării (câte virusuri sau bacterii sunt conținute în materialul studiat);
- sensibilitatea ridicată a metodei; de exemplu, sensibilitatea PCR pentru detectarea ADN-ului virusului hepatitei B în sânge este de 0,001 pg/ml (aproximativ 4×10² copii /ml), în timp ce sensibilitatea metodei de hibridizare a ADN-ului utilizând sonde ramificate este de 2,1 pg/ml (aproximativ 7×10⁵ copii /ml).
[