Mononucleoză infecțioasă: anticorpi la virusul Epstein-Barr în sânge

Mononucleoza infecțioasă este o afecțiune limfoproliferativă sistemică frecventă, cauzată cel mai adesea de virusul Epstein-Barr. Toxoplasma gondii și alte virusuri (CMV, virusul imunodeficienței umane și virusul herpes uman de tip 6, recunoscut ca fiind cauza exantemului brusc) pot provoca boli clinic similare. Acești aceiași agenți etiologici pot cauza, probabil, dezvoltarea sindromului oboselii cronice.

Virusul Epstein-Barr este un virus herpetic care are tropism pentru limfocitele B și persistă în celulele gazdă pentru o lungă perioadă de timp ca infecție latentă. Este răspândit în întreaga lume. Ca structură și dimensiune, virusul Epstein-Barr este imposibil de distins de alte virusuri herpetice, dar diferă semnificativ de acestea prin proprietățile antigenice. Virusul are un antigen de membrană (MA - antigen de membrană), un antigen nuclear (EBNA - antigen nucleic Epstein-Barr) și un antigen al capsidei virale (VCA - antigenul capsidei virale).

Infecția apare atunci când virusul se transmite prin saliva. Când virusul Epstein-Barr pătrunde în organism, acesta infectează epiteliul faringian, provocând inflamație și febră - semne clinice tipice apariției mononucleozei infecțioase. Virusul este strict limfotrop, atașându-se de receptorul C3α al membranei celulare a limfocitelor B, provocând proliferarea limfocitelor B policlonale cu o creștere corespunzătoare a amigdalelor, limfadenopatie sistemică și splenomegalie. Limfocitele B sunt transformate (dobândesc capacitatea de a se diviza la nesfârșit), iar în absența unui răspuns imun celular adecvat, acest proces poate evolua într-unul evident malign (de exemplu, în sindromul limfoproliferativ legat de cromozomul X). Dacă factorii imunității celulare controlează replicarea virusului Epstein-Barr în organism, simptomele clinice ale mononucleozei infecțioase dispar treptat.

Ca și alte herpesvirusuri, EBV poate persista ca infecție latentă (ADN-ul său este conținut în nucleul unui număr mic de limfocite B). Reactivarea asimptomatică ocazională a infecției este frecventă, aproximativ 20% dintre adulții tineri sănătoși excretând EBV în salivă. Persoanele cu imunitate celulară afectată (de exemplu, SIDA, ataxie-telangiectazie, pacienți cu transplant) pot dezvolta o infecție reactivă evidentă cu leucoplazie păroasă, pneumonită interstițială sau limfom monoclonal cu celule B. EBV a fost implicat în etiologia carcinomului nazofaringian și a limfomului Burkitt.

Una dintre manifestările mononucleozei infecțioase este apariția limfocitelor atipice în sângele periferic (până la 10% din numărul total de limfocite). Limfocitele atipice sunt detectate în sânge de la începutul perioadei de manifestări clinice ale infecției. Conținutul lor în sânge atinge un vârf până la sfârșitul celei de-a doua sau începutul celei de-a treia săptămâni și poate rămâne la acest nivel până la 1,5-2 luni, dispariția completă având loc de obicei până la începutul celei de-a patra luni de la debutul bolii. Prezența limfocitelor atipice este un semn relativ insensibil al infecției cauzate de virusul Epstein-Barr, dar are o specificitate generală de aproximativ 95%.

Proliferarea limfocitelor B policlonale în infecția cauzată de virusul Epstein-Barr generează un număr mare de autoanticorpi diverși în organismul pacientului, cum ar fi IgM anti-i (aglutinină rece), factor reumatoid, anticorpi antinucleari. Majoritatea Ig-urilor neobișnuite care apar în mononucleoza infecțioasă se numesc anticorpi heterofili Paul-Bunnell. Acești anticorpi aparțin clasei IgM, au afinitate pentru eritrocitele de oaie și de cal și nu sunt direcționați către niciun antigen al virusului Epstein-Barr. Anticorpii heterofili sunt un produs aleatoriu al proliferării limfoidelor B (cauzate de virusul Epstein-Barr), apar în prima săptămână de mononucleoză infecțioasă și dispar treptat în timpul recuperării, de obicei nefiind detectați după 3-6 luni.

Pe măsură ce stadiul acut inițial al infecției devine latent, genomurile virusului Epstein-Barr (antigene unice) apar în cantități mari în toate celulele, iar antigenul nuclear este eliberat în mediu. Ca răspuns la antigen, se sintetizează anticorpi specifici - markeri valoroși ai stadiului bolii. La scurt timp după infecție, limfocitele B detectează un antigen timpuriu (EA), o proteină necesară pentru replicarea virusului Epstein-Barr (și nu o componentă virală structurală). Anticorpii din clasele IgM și IgG sunt sintetizați în organismul pacientului împotriva antigenului timpuriu. Împreună cu virionul complet al virusului Epstein-Barr, apar antigenele capsidei virale (VCA) și antigenul membranar (MA). Pe măsură ce procesul infecțios se diminuează, un procent mic de limfocite B infectate cu virusul Epstein-Barr evită distrugerea imună și păstrează genomul viral într-o formă latentă. Antigenul nuclear al virusului Epstein-Barr (EBNA) este responsabil pentru duplicarea și supraviețuirea acestuia.

Testele de laborator pot detecta anticorpi la diverși antigeni.

Dintre metodele serologice de diagnosticare a mononucleozei infecțioase, cea mai frecventă este reacția Paul-Bunnell (aglutinare), care vizează identificarea anticorpilor heterofilici din ser. Un titru de anticorpi heterofilici de 1:224 sau mai mare în serul sanguin al pacientului este recunoscut ca semnificativ din punct de vedere diagnostic, confirmând diagnosticul de mononucleoză infecțioasă. Aglutinarea heterofilă este pozitivă la 60% dintre tineri după 2 săptămâni și la 90% după 4 săptămâni de la debutul manifestărilor clinice ale bolii. Prin urmare, pentru a diagnostica mononucleoza infecțioasă, este necesar să se efectueze mai multe studii: în prima săptămână a bolii (reacția poate fi negativă) și după 1-2 săptămâni (reacția poate deveni pozitivă). Conținutul de anticorpi heterofilici scade la sfârșitul perioadei acute a procesului infecțios, dar titrul acestora poate fi determinat în decurs de 9 luni de la debutul simptomelor clinice. Reacția Paul-Bunnell poate trece de la pozitivă la negativă, chiar și pe fondul simptomelor hematologice și clinice reziduale la pacient. Sensibilitatea metodei la adulți este de 98%, specificitatea - 99%. La copiii cu mononucleoză infecțioasă sub 2 ani, anticorpii heterofili sunt detectați doar la 30% dintre pacienți, la vârsta de 2-4 ani - la 75%, peste 4 ani - la mai mult de 90%. Sensibilitatea metodei la copii este mai mică de 70%, specificitatea - 20%. O scădere și apoi o creștere repetată a titrului de anticorpi heterofili poate apărea ca răspuns la o altă infecție (cel mai adesea cu infecții virale ale tractului respirator superior). Reacția Paul-Bunnell este nespecifică pentru virusul Epstein-Barr. Titrul anticorpilor heterofili nu reacționează încrucișat și nu se corelează cu anticorpii specifici împotriva virusului Epstein-Barr, existând, de asemenea, o corelație cu severitatea bolii. Testul este inutil pentru diagnosticarea mononucleozei infecțioase cronice (este pozitiv în medie doar la 10% dintre pacienți).

Titruri de 1:56 și mai mici pot fi găsite la persoane sănătoase și la pacienți cu alte boli (artrită reumatoidă, rubeolă). Rezultatele fals pozitive ale testelor sunt foarte rare.

În prezent, metoda „single spot” (aglutinare pe lamă) este utilizată pentru determinarea anticorpilor împotriva globulelor roșii din sângele ovin; este utilizată inițial ca test de screening. În ceea ce privește sensibilitatea, este comparabilă cu reacția Paul-Bunnell. Testele pe lamă pot fi fals pozitive în aproximativ 2% din studii (în leucemie, limfom malign, malarie, rubeolă, hepatită virală, carcinom pancreatic) și fals negative la adulți - în 5-7% din cazuri.

Trebuie menționat că gama de sisteme de testare diagnostică produse de companii pe baza determinării titrurilor de anticorpi este foarte largă, prin urmare este necesar să se concentreze asupra titrului de anticorpi diagnostici indicat în instrucțiunile pentru sistemele de testare.

Dacă nu se detectează anticorpi heterofili și tabloul clinic al bolii corespunde mononucleozei infecțioase, este necesar să se examineze serul sanguin pentru anticorpi specifici din clasele IgM și IgG. Pentru detectarea anticorpilor specifici împotriva virusului Epstein-Barr se utilizează metode de imunofluorescență indirectă (permit detectarea anticorpilor împotriva antigenelor EA și VCA), imunofluorescență anticomplement (detectează anticorpi împotriva antigenelor EA, VCA și EBNA) și ELISA.

Anticorpii împotriva componentei D a antigenului EA (anti-EA-D) apar chiar și în perioada latentă a infecției primare și dispar rapid odată cu recuperarea.

Anticorpii împotriva componentei R a antigenului EA (anti-EA-R) pot fi detectați la 3-4 săptămâni după manifestările clinice ale bolii. Aceștia persistă în serul sanguin timp de aproximativ un an și sunt adesea detectați în mononucleoza infecțioasă atipică sau prelungită. Acești anticorpi se găsesc de obicei în limfomul Burkitt.

Anticorpii anti-VCA clasa IgM (IgM anti-VCA) apar foarte devreme, de obicei înainte de simptomele clinice, fiind detectați la debutul bolii în 100% din cazuri. Titruri mari apar la 1-6 săptămâni de la debutul infecției, încep să scadă din a 3-a săptămână și dispar de obicei după 1-6 luni. IgM anti-VCA sunt aproape întotdeauna prezenți în ser în timpul infecției active, astfel încât metoda de detectare a acestora este foarte sensibilă și specifică pentru un episod acut de mononucleoză infecțioasă.

Anticorpii împotriva clasei IgG VCA (IgG anti-VCA) pot apărea devreme (la 1-4 săptămâni), numărul lor atingând un vârf până în a 2-a lună de boală. La debutul bolii, aceștia sunt detectați în 100% din cazuri. Doar 20% dintre pacienți prezintă o creștere de 4 ori a titrului la examinarea serurilor pereche. Titrul scade în timpul recuperării, dar este detectabil timp de mai mulți ani după infecție, deci este inutil pentru diagnosticarea mononucleozei infecțioase. Prezența IgG anti-VCA indică starea de după infecție și imunitatea.

Anticorpii anti-EBNA (anti-EBNA) apar ultimii, fiind rareori prezenți în faza acută a bolii. Conținutul lor crește în perioada de recuperare (în decurs de 3-12 luni), putând rămâne în sânge mulți ani după boală. Absența anti-EBNA în prezența IgM anti-VCA și IgM anti-EA indică o infecție curentă. Detectarea anti-EBNA după o reacție negativă anterioară indică o infecție existentă. Folosind metoda ELISA, este posibilă determinarea simultană a prezenței claselor IgM și IgG anti-EBNA. Dacă cantitatea de IgM anti-EBNA este mai mare decât cea de IgG anti-EBNA, trebuie discutată o infecție acută, cu raportul opus - una suferită anterior.

Prezența unuia sau mai multora dintre următoarele semne indică o infecție primară acută:

• IgG anti-VCA (depistat precoce, iar ulterior conținutul scade);
• titru ridicat (mai mult de 1:320) sau creștere de 4 ori a titrului de IgG anti-VCA în cursul bolii;
• creștere tranzitorie a titrului anti-EA-D (1:10 sau mai mult);
• IgG anti-VCA precoce fără anti-EBNA și, ulterior, apariția anti-EBNA.

Infecția acută sau primară cauzată de virusul Epstein-Barr este exclusă dacă titrurile de IgG anti-VCA și anti-EBNA din serul sanguin nu se modifică atunci când sunt studiate dinamic (în perioada acută și în timpul recuperării).

Prezența persistentă a antigenului precoce și a IgG anti-VCA în titruri ridicate indică o fază cronică a infecției.

Depistarea anticorpilor împotriva virusului Epstein-Barr este utilizată pentru diagnosticarea mononucleozei infecțioase și a infecțiilor cronice cauzate de virusul Epstein-Barr.

Anticorpii împotriva virusului Epstein-Barr pot fi detectați în următoarele boli: stări de imunodeficiență secundară, inclusiv infecția cu HIV, carcinomul nazofaringian, limfomul Burkitt, infecția cu CMV, sifilisul, boala Lyme, bruceloza etc.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]