Mononucleoza infecțioasă: anticorpi ai virusului Epstein-Barr din sânge

Mononucleoza infecțioasă este o boală comună sistemică limfoproliferativă, cel mai frecvent cauzată de virusul Epstein-Barr. Toxoplasma gondii și alți viruși (CMV, virusul imunodeficienței umane și virusul herpesvirus uman 6, recunoscut ca fiind cauza exantemului brusc) pot provoca boli similare clinic. Acești acei agenți etiologici sunt probabil capabili să determine dezvoltarea sindromului de oboseală cronică.

Virusul Epstein-Barr este un virus din grupul herpes, are tendința de a limfocitelor B, persistă mult timp în celulele gazdă ca o infecție latentă. Este distribuit pe scară largă în întreaga lume. Prin structură și mărime, virusul Epstein-Barr este indistinguizabil față de alți herpesvirusuri, dar diferă semnificativ de acestea în proprietățile antigenice. Virusul are un antigen membranar (antigenul membranei MA), un antigen nuclear (antigen nucleic EBNA-Epstein-Barris) și un antigen capsid viral (VCA).

Infectia are loc atunci cand virusul este transmis cu saliva. Virusul Epstein-Barr, atunci când este ingerat, infectează epiteliul faringian, provocând inflamații și semne clinice tipice de febră a debutului de mononucleoză infecțioasă. Strict virusul limfotropic, care unește cu membrana celulară a receptorului S3α limfocitelor B induce proliferarea limfocite B policlonale cu o creștere corespunzătoare a amigdalelor, limfadenopatie sistemică și splenomegalie. Limfocitele B sunt transformate (dobândesc capacitatea de a divizare infinit), și în absența unui răspuns imun celular adecvat, acest proces poate evolua (de exemplu, sindromul limfoproliferative X-linked), evident, malign. Dacă factorii de imunitate celulară controlează replicarea virusului Epstein-Barr în organism, atunci simptomele clinice ale mononucleozei infecțioase dispar treptat.

Ca si alte herpesvirusuri, virusul Epstein-Barr poate persista o infectie latenta (ADN-ul conținut în miezul unei cantități mici de limfocite B). Reactivarea episodică asimptomatică a infecției este frecventă, aproximativ 20% dintre tinerii sănătoși eliberează virusul Epstein-Barr cu saliva. La persoanele cu o imunitate celulară deteriorată (de exemplu SIDA, ataxia-telangiectazia la pacienții cu transplant) pot dezvolta o infecție clară reactivă cu leucoplachia, pneumonită interstițială, sau sub forma unui limfom monoclonal cu celule B. Cu virusul Epstein-Barr, etiologia carcinomului nazofaringian și a limfomului Burkitt este legată.

Una dintre manifestările de mononucleoză infecțioasă este apariția în sângele periferic a limfocitelor atipice (până la 10% din numărul total de limfocite). Limfocitele atipice se găsesc în sânge de la începutul perioadei de manifestare clinică a infecției. Concentrația lor în sânge atinge un vârf spre sfârșitul de 2 sau începutul celei de a treia săptămână și pot fi menținute la un nivel de 1,5-2 luni, dispariția completă se întâmplă de obicei la începutul celei de a 4 luni de debut. Prezența limfocitelor atipice este un semn relativ insensibil de infecție cauzat de virusul Epstein-Barr, dar are o specificitate totală de aproximativ 95%.

Proliferarea limfocite B policlonale în infecția cauzată de virusul Epstein-Barr, generează o mare varietate de autoanticorpi la pacient, cum ar fi IgM anti-i (aglutinina rece), factorul reumatoid, anticorpi antinucleari. Cele mai multe dintre cele neobișnuite care apar în mononucleoza infecțioasă sunt numite anticorpi heterofilii de Paul-Bunnel. Acești anticorpi sunt clasificați ca IgM, au o afinitate pentru eritrocitele de carne de oaie și cal, care nu sunt direcționate către nici un antigen al virusului Epstein-Barr. Anticorpii heterofili - Produse aleatorii B-limfoid de proliferare (cauzate de virusul Epstein-Barr), ele apar în prima săptămână a mononucleozei infecțioase și dispar treptat în convalescență, acestea nu sunt de obicei detectate în 3-6 luni.

Deoarece stadiul inițial acut de infecție devine latent, genomii virusului Epstein-Barr (antigeni unici) apar în număr mare în toate celulele, iar antigenul nuclear este eliberat în mediu. Ca răspuns la antigen, anticorpii specifici sunt sintetizați-markeri valoroși ai stadiului bolii. La scurt timp după infectarea limfocitelor B, se detectează un antigen timpuriu (EA), o proteină necesară pentru replicarea virusului Epstein-Barr (și nu o componentă virală structurală). Pentru antigenul timpuriu în corpul pacientului, sunt sintetizați anticorpi de clase IgM și IgG. Împreună cu virusul complet al virusului Epstein-Barr, apar antigene ale capsidului viral (VCA) și ale antigenului membranar (MA). Pe măsură ce procesul infecțios dispare, un mic procent de limfocite B infectate cu virusul Epstein-Barr evită distrugerea imunității și reține genomul viral într-o formă latentă. Antigenul nuclear (EBNA) al virusului Epstein-Barr este responsabil pentru suprapunerea și supraviețuirea acestuia.

Testele de laborator pot detecta anticorpi la diferite antigene.

Din metodele serologice de diagnosticare a mononucleozei infecțioase, reacția Paul-Bunnel (aglutinare) este cea mai obișnuită, care vizează detectarea anticorpilor heterofili în ser. Titrul de anticorpi heterofili 1: 224 și mai mare în serul pacientului este recunoscut ca fiind semnificativ din punct de vedere diagnostic, confirmând diagnosticul de mononucleoză infecțioasă. Aglutinarea heterofilică este pozitivă la 60% dintre tineri după 2 săptămâni și la 90% după 4 săptămâni de la apariția manifestărilor clinice ale bolii. Prin urmare, sunt necesare mai multe studii pentru a diagnostica mononucleoza infecțioasă: în prima săptămână a bolii (reacția poate fi negativă) și 1-2 săptămâni mai târziu (reacția poate deveni pozitivă). Conținutul de anticorpi heterofilici scade după sfârșitul perioadei acute a procesului infecțios, dar titrul lor poate fi determinat în termen de 9 luni de la apariția simptomelor clinice. Reacția Paul-Bunnel se poate transforma de la pozitiv la negativ, chiar și pe fundalul simptomelor hematologice și clinice reziduale la pacient. Sensibilitatea metodei la adulți este de 98%, specificitatea este de 99%. La copiii cu mononucleoză infecțioasă înainte de vârsta de 2 ani, anticorpii heterofili pot fi detectați numai la 30% dintre pacienți, la vârsta de 2-4 ani - la 75%, peste 4 ani - în peste 90%. Sensibilitatea metodei la copii este mai mică de 70%, specificitatea este de 20%. Reducerea și apoi re-creșterea titrului de anticorpi heterofili poate să apară ca răspuns la o altă infecție (cel mai adesea în infecțiile virale ale tractului respirator superior). Răspunsul Paul-Bunnel nu este specific pentru virusul Epstein-Barr. Titrul de anticorpi heterofili nu dă o reacție încrucișată și nu se corelează cu anticorpi specifici față de virusul Epstein-Barr și nici nu se corelează cu severitatea cursului bolii. Testul este inutil pentru diagnosticarea formei cronice de mononucleoză infecțioasă (pozitiv în medie doar la 10% dintre pacienți).

Titrurile 1:56 sau mai puțin se găsesc la persoanele sănătoase și la pacienții cu alte boli (poliartrita reumatoidă, rubeolă). Rezultatele testului fals pozitiv sunt îndeplinite foarte rar.

În prezent, pentru a determina anticorpi la eritrocitele unui berbec, se folosește metoda "spot singular" (aglutinarea diapozitivelor), care este inițial utilizată ca test de screening. Prin sensibilitate, este comparabil cu reacția Paul-Bunnel. Slide teste pozitive false pot fi de aproximativ 2% din studii (leucemie, limfom malign, malarie, rubeolă, hepatita virală, carcinom de pancreas) și adulți fals negative - 5-7% din cazuri.

Trebuie notat faptul că spectrul sistemelor de testare de diagnostic produse de firme pe baza determinării titrului de anticorpi este foarte larg, deci este necesar să se concentreze pe titrul de diagnostic al anticorpilor specificat în instrucțiunile pentru sistemele de testare.

Dacă nu sunt identificați anticorpi heterofili și tabloul clinic corespunde mononucleozei infecțioase, este necesar să se examineze ser pentru anticorpi specifici ai IgM și IgG. Pentru detectarea anticorpilor specifici virusului Epstein-Barr, folosind metode de imunofluorescență indirectă (permit detectarea anticorpilor la antigeni VCA și EA) antialexin-imunofluorescenta (detectarea anticorpilor la EA, VCA și antigen EBNA) și IFA.

Anticorpii la componenta antigenului EA (anti-EA-D) apar chiar în perioada latentă a infecției primare și dispar rapid cu recuperarea.

Anticorpii la componenta antigenului EA (anti-EA-R) pot fi detectați la 3-4 săptămâni după manifestările clinice ale bolii. Acestea persistă în serul de sânge timp de aproximativ un an, adesea detectate cu curente atipice sau prelungite de mononucleoză infecțioasă. De obicei, acești anticorpi se găsesc cu limfomul Burkitt.

Anticorpi la IgM de clasa VCA (anti-VCA IgM) apar foarte devreme, de obicei la simptome clinice, sunt detectate la debutul bolii în 100% din cazuri. Titrurile înalte apar în săptămâna 1-6 de la debutul infecției, încep să scadă din a treia săptămână și de obicei dispar după 1-6 luni. Anti-VCA IgM este aproape întotdeauna prezent în serul cu infecție activă, astfel încât metoda de detectare a acestora este foarte sensibilă și specifică pentru un episod acut de mononucleoză infecțioasă.

Anticorpi la clasa VCA IgG (anti-VCA IgG) pot apărea devreme (în săptămâna 1-4), cantitatea lor atingând un maxim până în a doua lună a bolii. La începutul bolii, ele se găsesc în 100% din cazuri. Doar 20% dintre pacienți au prezentat o creștere de 4 ori a titrului în studiul serurilor pereche. Titrul scade la recuperare, dar se găsește în câțiva ani după infecția transferată, prin urmare este inutil pentru diagnosticul de mononucleoză infecțioasă. Prezența IgG anti-VCA indică o stare după infecție și imunitate.

Anticorpii la EBNA (anti-EBNA) apar mai târziu decât toți, sunt rareori prezenți în faza acută a bolii. Conținutul lor crește în timpul perioadei de recuperare (în decurs de 3-12 luni), acestea pot persista în sânge timp de mulți ani după boală. Lipsa anti-EBNA în prezența IgM anti-VCA și anti-EA IgM indică o infecție curentă. Detectarea anti-EBNA după o reacție negativă anterior indică o infecție existentă. Atunci când se utilizează metoda ELISA, este posibilă detectarea simultană a prezenței claselor anti-EBNA de IgM și IgG. Dacă cantitatea de IgM anti-EBNA este mai mare decât IgG anti-EBNA, trebuie luată în considerare o infecție acută, relația inversă fiind cea anterioară.

În favoarea unei infecții acute acute, unul sau mai multe dintre următoarele simptome indică prezența:

• anti-VCA IgG (detectată devreme, iar ulterior conținutul este redus);
• Titru mare (mai mare de 1: 320) sau creștere de 4 ori a titrului anti-VCA IgG în cursul bolii;
• o creștere tranzitorie a titrului de anti-EA-D (1:10 sau mai mare);
• anti-VCA IgG precoce fără anti-EBNA, și mai târziu - apariția anti-EBNA.

Infecția acută sau primară cauzată de virusul Epstein-Barr este exclusă dacă titrurile anti-VCA IgG și anti-EBNA din ser nu se modifică atunci când sunt testate în dinamică (perioadă acută și recuperare).

Prezența constantă a antigenului timpuriu și a IgG anti-VCA la titruri înalte indică o fază cronică de infecție.

Detectarea anticorpilor la virusul Epstein-Barr este folosită pentru a diagnostica mononucleoza infecțioasă și infecțiile cronice cauzate de virusul Epstein-Barr.

Anticorpii la virusul Epstein-Barr pot fi detectate în următoarele boli: imunodeficiențe secundare, inclusiv infecția cu HIV, carcinomul nazo-faringian, limfom Burkitt, infecția cu CMV, sifilis, boala Lyme, bruceloza, și altele.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]