Markeri imunohistochimici în diagnosticul leziunilor precanceroase ale mucoasei bucale și marginea roșie a buzelor

Diagnosticarea în timp util și eficace a leziunilor neoplazice ale mucoasei orale (CRS) și ale marginii roșii (CCG) rămâne o problemă serioasă a oncostomatologiei. Carcinomul cu celule scuamoase din cavitatea bucală ocupă locul șase în lume în frecvență în rândul tumorilor maligne ale tuturor localizărilor. În Federația Rusă, incidența neoplasmelor maligne ale cavității bucale este de 2-4% din numărul total de tumori maligne ale omului.

În ultimii ani, structura bolilor mucoasei orale a suferit modificări semnificative, în special, o creștere a proporției bolilor precanceroase. În acest sens, detectarea efectivă neinvazivă a semnelor de malignitate rămâne o sarcină urgentă a stomatologiei.

În ciuda simplității aparente a predictor imagistica clinice a modificărilor ale mucoasei orale și CGC în legătură cu localizarea externă, determinarea precancer nosologică, bazat numai pe impresia de inspecție și palpare, de multe ori duce la erori de diagnostic au fost diferite grade de cheratinizare sau ulcerație chiar elemente markornyh înfrângerea face dificilă diferențierea acestora. Diagnosticul precoce în special dificil de tumori maligne, deoarece apar simptomele sale clinice un pic mai târziu, de fapt, a avut loc transformare malignă.

Astfel, cercetarea lui V.P. Kharchenko și colab. Se demonstrează că mai mult de 2/3 dintre pacienți la momentul tratamentului în instituția medicală și stabilirea diagnosticului au stadii III-IV ale bolii. Unul dintre motivele tratamentului târziu este "estomparea" imaginii clinice în stadiile inițiale ale bolii. În plus, a fost demonstrată necesitatea de a efectua o muncă organizatorică și metodică și de a crește nivelul cunoștințelor medicilor dentiști cu privire la manifestările clinice precoce ale bolilor precanceroase ale mucoasei orale. Testarea efectuată a arătat că doar 42,8% dintre dentiști diferențiază manifestările timpurii ale cancerului oral, 4,2% dintre respondenți pot efectua corect măsuri de diagnostic primar pentru detectarea cancerului la această localizare.

Procentul de forme incurabile de cancer al mucoasei orale din cauza erorilor de diagnostic, conform autorilor diferiți, ajunge la 58,4-70%. Situația este complicată de problemele nerezolvate ale diagnosticului clinic al precancerului, în special de dificultatea de a diferenția debutul malignității, precum și de problema alegerii unei metode de tratare a unei boli pre-tumorale. Nu există indicii absolute și relative pentru biopsie, în special la etapele tratamentului conservator. Până în prezent, nu există un singur exemplu în literatura de specialitate privind criteriul de diagnostic al nivelului clinic pe care un dentist ar putea să-l facă referitor la alegerea unei metode adecvate pentru tratarea unei anumite boli pre-tumorale.

Rezolvarea dificultăților de diagnosticare pe care majoritatea autorilor le văd în metodele auxiliare de diagnosticare (citologie, cheilostomatoscopie, biomicroscopie, tomografie de coerență optică). Cu toate acestea, aceste metode sunt destul de subiective, deoarece acestea poartă doar caracterul descriptiv al modificărilor calitative ale țesuturilor afectate. O modalitate de cuantificare a modificărilor morfologice este determinarea markerilor imunohistochimici.

Introducerea în practica modernă a metodelor morfologice moderne de verificare a tumorii a îmbunătățit semnificativ calitatea diagnosticului și tratamentului tumorilor maligne. Posibilitati metodologice de oncologie moleculare moderne sa adâncit în prezent, prin intermediul unor studii imunohistochimice poate determina nu numai diagnosticul histologic al tumorii, dar, de asemenea, pentru a da caracteristici morfofuncționale în termeni de agresivitate și prognostic în legătură cu leziunile precanceroase si cancerul a dezvoltat deja.

Conform ideilor moderne, baza transformării maligne a celulelor este activarea oncogenelor celulare sau a genelor supresoare unice sau multiple. Se observă la 30% din cazurile de cancer la om și în multe cazuri poate fi detectat imunohistochimic. S-au studiat oncogene ras p21, HER2 / neu, bcl-2 și gene supresoare p53 și Rb în diferite tumori. Unele dintre oncogenele listate (și genele supresoare) sunt semne prognostice și predictive independente.

Epiteliul mucoasei orale este localizarea praedifectionis a formării tumorilor canceroase. Factori externi (site-uri de ocluzie traumatice, marginile ascuțite ale restaurări de proiectare ortopedică insolvabil, irațională igienă orală individuală, leziuni inflamatorii și distructive parodontale), împreună cu factori genetici (ereditari) pot juca un rol in care cauzeaza cancer al acestei localizare. In dezvoltarea carcinomului cu celule scuamoase leziunii mucoasei orale pot fi implicate în mecanismele de control al proceselor de hiperplazie epitelială și metaplazie scuamoasă.

Caracteristici morfologice ale epiteliului mucoasei orale in timpul malignitate asociat cu o modificare într-un set de diferențiere (cytokeratin fenotip strat în principal epitelial) markerii de expresie CEA precum marker de proliferare Ki - 67.

P53 - gena tumora - produs supresoare de proteine, care este un factor de transcripție nucleară cu multe funcții, inclusiv blocarea trecerea celulelor asupra ciclului celular și inducerea apoptozei. Proteina p53 este exprimată în toate celulele corpului. În absența deteriorării aparatului genetic, proteina p53 se află într-o stare inactivă și atunci când apare deteriorarea ADN, ADN-ul este activat. Activarea constă în dobândirea capacității de a se lega de ADN și de a activa transcripția genelor care conțin o secvență de nucleotide în regiunea de reglare, care este notată de elementul de răspuns p53. Mutație p53 in celulele care apar la aproximativ 50% din cazurile de cancer, conduce la sinteza proteinelor cu pierderea funcțiilor sale, dar având o stabilitate ridicată și se acumulează în nucleu care imunohistochimic exprimat într-o colorație nucleară distinctă.

Tipul "sălbatic" al genei onsupresoare wt-53 și proteina p53 codificată de ea joacă un rol central în dezvoltarea apoptozei. Când ADN-ul este deteriorat, apare expresia genei wt53 și a proteinei corespunzătoare. Acesta din urmă blochează ciclul celular în faza G1-S și astfel inhibă replicarea ulterioară a ADN-ului deteriorat, care este sintetizat în faza S și creează condiții pentru îndepărtarea site-ului deteriorat și repararea situsului său modificat. Dacă apare o reparație, celula continuă să se împartă și să dea generație de celule sănătoase. Cu toate acestea, dacă repararea nu are loc, atunci sunt incluse și alte mecanisme care asigură distrugerea unei astfel de celule cu ADN deteriorat (mutagen), i. E. Se dezvoltă programul genetic al morții celulare - apoptoza.
În ultimii ani, sa sugerat că statutul p53 poate fi un factor decisiv determinând sensibilitatea unei tumori la chemo- și radioterapie. Confirmarea acestei presupuneri constă în numeroase studii care demonstrează că p53 mutant este un factor de prognostic scăzut și ineficiență a terapiei adjuvante pentru diferite neoplasme ale mucoasei orale.

Markerii proliferării sunt, de asemenea, o valoare diagnostică extrem de informativă în prezicerea cursului tumorilor maligne. Activitatea proliferativă este un factor determinant atât în mecanismul de transformare malignă a celulelor, cât și în comportamentul biologic al tumorilor deja emergente. Un marker promițător al activității proliferative este antigenul Ki-67, care este exprimat practic în toate fazele ciclului celular și, în consecință, reflectă amploarea piscinei proliferative. Gena care codifică Ki-67 este localizată pe brațul lung al cromozomului 10. Ki-67 se referă la proteinele de reglare. Aspectul său coincide cu intrarea celulei în mitoză, ceea ce face posibilă utilizarea acesteia ca marker universal al proliferării în evaluarea creșterii tumorilor maligne.

O serie de studii care investighează valoarea diagnostică a markerilor imunohistochimici in estimarea fluxului leziunilor precanceroase ale mucoasei bucale și granița Vermilion. Murti PR și colab. A studiat expresia p53 cu SSRI roșu cu rată fixă. La determinarea expresiei imunohistochimică a p53 nu a identificat starea maligne precancer mucoasei bucale. Autorii au sugerat ca supraexpresia p53 vârf de timp apropiat de momentul de transformare a precancere, și nu poate fi utilizat ca un marker precoce de malignitate predictie precancer mucoasei orale. Alți cercetători au descoperit că genele umane TP53 codifică cel puțin 9 izoforme diferite. Un alt membru al familiei p53, p63 include 6 izoforme diferite și joacă un rol-cheie în dezvoltarea mucoasei orale, glandele salivare, pielea și dinții. S-a sugerat că p63 este asociat cu dezvoltarea de carcinom cu celule scuamoase al capului și gâtului. Cu toate acestea, nu au fost detectate modificări semnificative statistic în exprimarea noilor izoforme ale p53 și p63 la GPRS precanceroase comparativ cu tesutul nemodificat. Studii De Sousa FA a confirmat valoarea predictivă marker p53 pentru determinarea potențialului malign de transformare precancer mucoasei bucale. În același timp, unii autori cred ca p53 nu poate fi utilizat ca marker numai pentru predicția de dezvoltare a cancerului.

Avion detectare imunohistochimică prognostic la fel de promițător este reprezentat în studiat probele de țesut podoplanina - membrană integrală exprimată mucoprotein ca nealterat și endoteliul inflamatorii și neoplazice capilarelor limfatice alterate. Cercetătorii au descoperit o podoplanina semnificativa statistic expresie relație iABCG2 (legare la ATP G2 proteină subgrupei) cu riscul de transformare malignă a lichen plan (riscul a fost semnificativ mai mare cu podoplanina coexpression și ABCG2, decât fără podoplanina coexpression și ABCG2) și a concluzionat că podoplanin și ABCG2 pot fi utilizate ca biomarkeri pentru evaluarea riscului de transformare malignă cu leziuni precanceroase RBCU

Cercetările cercetătorilor străini au confirmat semnificația diagnostică a expresiei Fas / FasL ca biomarkeri ai dezvoltării cancerului. Fas este un transmembranară de tip I glicoproteic (sinonime APO-I, CD95) și induce apoptoza în celulele după interacțiunea cu ligand de Fas (FasL) sau un anticorp monoclonal agonistic împotriva Fas.

În același timp, se știe că Fas este exprimat în aproape toate tipurile de țesuturi. Creșterea expresiei Fas se observă în rinichi, ficat, inimă și timus. În plus, acest receptor este exprimat pe multe tumori, precum și în celule infectate cu virus. Motivul pentru rezistența diferitelor tipuri de celule la apoptoza dependentă de Fas poate fi creșterea producției de Fas solubil de către aceste celule. Fas solubil este un produs de splicare alternativă și este capabil să inhibe apoptoza indusă de anticorpi monoclonali agoniști împotriva Fas sau FasL.

Astfel, interpretarea ambiguă a rezultatelor cercetărilor efectuate de către diferiți autori conduce la concluzia că, în stadiul actual de oncologie moleculara utiliza marcator imunohistochimică prospectiv în combinație cu alte metode de diagnostic și prognoză a leziunilor premaligne ale mucoasei bucale.

O relevanță deosebită este problema poziționării markerilor imunohistochimici pentru semnificația diagnosticului. Credem că, în ordinea descrescătoare a importanței, ele pot fi aranjate în următoarea ordine:

1. Markeri imunohistochimici cu importanță diagnostică ridicată: subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Markeri imunohistochimici cu un grad mediu de semnificație diagnostică: Bax, MMP-9;
3. Promotori markeri imunohistochimici, a căror semnificație diagnostică necesită studii suplimentare: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Markerii imunohistochimici, a căror semnificație diagnostică pentru prezicerea cursului bolilor precanceroase nu este dovedită: p53, p63.

Pe baza acestei analize a datelor literaturii se poate concluziona că determinarea markerilor imunohistochimici nu trebuie privită ca singura metodă de a prezice cursul leziunilor precanceroase ale mucoasei bucale și identificarea riscului de transformare malignă, dar, cu toate acestea, metoda are o valoare diagnostică ridicată în asociere cu alte metode de predicție a cursului bolilor precanceroase.

Cercetător principal Kuznetsova Roza Gilevna. Indicatori imunohistochimici în diagnosticul leziunilor precanceroase ale membranei mucoase a gurii și marginea roșie a buzelor // Medicină practică. 8 (64) Decembrie 2012 / volumul 1

[1], [2], [3], [4], [5]