Microscopia confocală

Microscopia confocală este considerată acum una dintre cele mai promițătoare metode de imagistică a pielii in vivo și, prin urmare, interesul atât în rândul medicilor, cât și în rândul reprezentanților institutelor de cercetare științifică este neobișnuit de ridicat.

[1], [2], [3], [4]

Funcții microscopice confocale

În dermatologie, microscopia cu laser confocală este utilizată pentru:

• studiați penetrarea compușilor în piele (căile de penetrare, cinetica, distribuția în piele);
• observarea glandelor (definirea stării active și pasive);
• studii ale patului microcirculator (inclusiv în timp real);
• diagnosticul de neoplasme.

Fără a discuta meritele și defectele de tipurile de mai sus de microscopie confocală, observăm că tot mai mare rigoare castiga popularitate fluorescenta microscopie confocală cu laser în ultimii ani.

[5], [6], [7],

Microscopie confocală pentru examinarea pielii

Microscopie confocala oferă două posibilități de nepretuit - studiu de tesuturi la nivel celular într-o stare de viață fiziologică și demonstrații ale rezultatelor cercetării (adică, activitatea celulară ..) In patru dimensiuni - înălțime, lățime, adâncime și de timp. Pentru calitatea imaginii și profunzimea studiului, cel mai important rol îl joacă capacitatea țesutului de a transmite lumina, cu alte cuvinte, transparența sa. Metoda de microscopie confocală este non-contact, raza de lumină nu cauzează nici un rău sau disconfort pacientului sau animalului experimental.

Pentru a studia pielea, se utilizează microscopia laser cu scanare confocală (CSLM). Metoda vă permite să vedeți epiderma și stratul de dermă papilară cu o rezoluție apropiată de cea histologică. Toate rezultatele sondajului sunt afișate pe monitor și salvate ca un pachet de fișiere imagine (sub formă de microfilm (dinamică) sau microfotografice).

Există două tipuri de metode:

• Reflexivă (reflectarea CSLM) - se bazează pe faptul că diferitele structuri intracelulare și intercelulare au un indice diferit de refracție a luminii, ceea ce permite obținerea unei imagini de contrast.
• Fluorescent (fluorescență CSLM) - foloseste o lumina laser pătrunde în piele și stimularea sau endohromofory exo care au răspuns încep să emită fotoni (de exemplu, prezintă fluorescență ..).

Rezoluția laterală este distanța minimă dintre punctele situate pe planul orizontal, adică un plan paralel cu suprafața pielii. Rezoluția axială este distanța minimă dintre punctele situate pe un plan perpendicular pe suprafața pielii.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Istoria microscopiei confocale

Ideea de a crea un microscop capabil la nivel celular pentru a arăta o tăietură intravilantă de țesut viu a fost dezvoltată activ acum 130 de ani. Elementul principal al microscoapelor moderne a fost proiectat la sfârșitul secolului al XIX-lea și a fost un disc rotativ cu cele mai mici găuri amplasate spiralat. Acest disc a fost inventat în 1883 de către un student german, Paul Nipkov, în numele căruia ia primit numele - discul Nipkov (sau discul nipkov). Invenția se baza pe capacitatea luminii, care trece prin cele mai mici găuri ale discului și ale lentilei magnifice, să pătrundă în adâncimea țesutului și să ilumineze fragmentul celular la o distanță de suprafață. Când discul se rotește rapid, fragmentele sunt adăugate la imaginea de ansamblu. Prin îndepărtarea sau apropierea structurii de obiect, adâncimea secțiunii optice a țesutului examinat poate fi variată.

Numai odată cu apariția VTR-urilor în anii 1980 și a calculatoarelor capabile de prelucrarea imaginilor, la începutul anilor 1990 a existat o ocazie reală de a crea și de a aplica în mod eficient acele microscoape moderne folosite în epoca noastră.